виды, методы борьбы и профилактики

Картофельная нематода – крохотный, до 1мм в длину, круглый червь, которого вполне можно охарактеризовать народной поговоркой: «В воде не тонет, в огне не горит». Этот вредитель действительно кажется неуязвимым: его яйца зимуют в почве и не гибнут даже в самые лютые морозы. Нематоде картофеля нипочём засуха, наводнения, радиация (доза облучения, способная убить червя, в 20 раз превышает дозу, смертельно опасную для человека). Размножается вредитель очень быстро. Несмотря на миниатюрность отдельных особей, эти паразиты способны погубить до 80% урожая.

Родина картофельной нематоды – Южная Америка. В Европу этот паразит попал чуть более 100 лет назад: в 1913 году, – а на территорию РФ и того позже, в 1949, из Германии. Первые очаги заражения возникли в Калининградской области.

Сейчас в зоне риска находятся районы, граничащие с Украиной и Казахстаном, а также Ленинградская область. После обнаружения в какой-либо местности картофельной нематоды немедленно объявляют карантин. Благодаря этому распространение вредителя удалось замедлить. Большая часть заражённых земель (90%) – приусадебные участки.

Виды нематоды картофеля

Золотистая нематода. Этот вредитель проникает в корень куста и питается его соками, препятствуя доступу полезных веществ к другим частям растения. В результате картофель преждевременно сохнет, начиная с нижних листьев. Клубни под поражённым нематодой кустом – или очень мелкие, или вообще не образуются, корневая система – чрезмерно разветвлённая (огородники называют это «бородатостью»).

Самцы золотистой нематоды картофеля похожи на обычных крохотных червячков. Они вообще не питаются и живут всего 10 дней. Их задача – оплодотворить самок. У самок тело шаровидное, уже через несколько дней после оплодотворения оно начинает наполняться яйцами. К осени тело самки темнеет, приобретая золотисто-коричневый оттенок.

Золотистая нематода — самая распространенная в РоссииКорневая система пораженного куста

Осенью самки погибают, превращаясь в капсулы-цисты, каждая из которых содержит до 800 яиц. Цисты могут пролежать в земле даже 10 лет. Из одной и той же цисты личинки вылупляются не одновременно: иногда этот процесс занимает до 6 лет. Оболочка капсулы достаточно прочна, и цисты без ущерба для яиц переносятся с ветром или с потоками дождевой воды.

Золотистая картофельная нематода паразитирует на корнях всех растений из семейства паслёновых: на картофеле, томатах, баклажанах, физалисе, перцах.

Бледная нематода. От золотистой нематоды отличается только цветом: по мере развития тело самки из белого становится коричневым.

Бледная нематода под микроскопом

Стеблевая нематода. Этот червь размером до 1 мм поражает стебли растения, клубни. Распознать клубень, в котором поселились паразиты, легко: на кожуре отчётливо видны крохотные тёмные пятнышки. Непосредственно под кожурой – участки светлой, но рыхлой мякоти. В случае тяжёлого поражения кожура растрескивается, под ней образуется труха (сухая гниль).

Стеблевая нематода интенсивно размножается во влажной среде. Особенно «любит» паразит сырые подвалы, где переползает с одного клубня на другой, постепенно заражая весь семенной материал.

Стеблевая нематода проявляется на клубне

Галловая нематода. Этот вид нематоды паразитирует на корнях и клубнях картофеля, но не брезгует и тыквенными (тыквами, кабачками, патиссонами, дынями). Симптом галловой картофельной нематоды – бугристость клубней. Иногда на корнях растений образуются наросты (галлы) диаметром до 3 см. Вредитель препятствует доступу к стеблям растений воды и питательных веществ.

Признаки появления нематоды картофеля

Зачастую нематоду на участках обнаруживают лишь тогда, когда заражённость почвы достигнет критической величины. Один из косвенных признаков появления – наличие на картофельном поле «проплешин»: когда среди зеленеющей ботвы несколько кустов без причины желтеют и сохнут.

Если вырвать больной куст с корнем, то под ним, скорее всего, обнаружится несколько очень мелких клубней. Под лупой на корнях могут быть видны крохотные жёлтые «песчинки» – цисты. Но даже если никаких цист не заметно, беспричинно увядший куст следует аккуратно, вместе с клубнями и комом почвы (примерно 1 кг) отнести в лабораторию. Там специалисты определят наличие и концентрацию картофельной нематоды.

Пораженные кусты мелкие и быстро желтеют

Способы профилактики и борьбы с картофельной нематодой

Картофельная нематода – коварный враг, и победить её можно только при использовании целого комплекса методов. Действенных и безопасных для человека способов полного уничтожения картофельной нематоды не существует. Тем не менее, отчаиваться не стоит. В Европе этот паразит появился гораздо раньше, чем в России, карантинных участков там едва ли не больше, однако тамошние урожаи картофеля (особенно голландские) достаточно высоки.

Если случилось так, что ваш участок находится в карантинной зоне, то, соблюдая некоторые правила, вы сможете выращивать хороший картофель. Единственное, что нужно помнить: картофель из карантинных зон можно употреблять в пищу или перерабатывать на местных предприятиях, но нельзя продавать в другие районы.

Для того чтобы окончательно справиться с картофельной нематодой, понадобится не одно десятилетие упорного труда, но значительно снизить численность её популяции можно в течение одного – двух лет.

Если количество нематоды не превышает 3-5 цист на 100 см³ почвы, то вредитель почти не влияет на картошку. Урожайность ощутимо снижается в том случае, когда в 100 см³ почвы обнаруживается 10-16 и более цист.

Существует несколько простых и доступных способов борьбы с картофельной нематодой:

Севооборот. Картофель нельзя из года в год сажать на одном и том же участке. Если даже не применять других методов, а просто сажать картошку на одном месте не чаще, чем раз в три – четыре года, участок окажется серьёзно заражённым картофельной нематодой не раньше, чем через 45 лет.

Если участок слишком мал, и возможностей для севооборота нет, можно сажать сорта картофеля устойчивые к нематоде: Сантэ, Криницу, Ред Скарлет, Атлант, Розару, Веснянку, Уладар, Бриз, Верас, Лилею, Янку, Лазурит, Скарб, Журавинку, Родригу. Корневая система этих сортов не просто устойчива к паразиту, а убивает до 80% личинок нематоды.

Но вредители очень быстро адаптируются. Поэтому рекомендуется нематодоустойчивые сорта сажать только три года подряд, а на четвёртый год – использовать семенной материал обычного сорта. Есть и другой вариант: выращивать только нематодоустойчивые сорта, но раз в четыре года их менять.

Осенью всю ботву и сорняки с заражённого участка следует сжечь. Необходимо соблюдать меры предосторожности: все рабочие инструменты после сбора урожая нужно продезинфицировать 4% раствором формалина.

Азотнокислые удобрения для картофельной нематоды – отрава. Поэтому и осенью, и весной в почву можно внести мочевину.

Если поражённый нематодой участок мал, рекомендуется вырыть яму глубиной 1 м, собрать в ней заражённую ботву и сорняки, после чего засыпать мочевиной из расчёта 5-6 кг на 1 м³ зелени. Сверху всё присыпать землёй с незаражённого участка.

Перед проращиванием тщательно отобрать только здоровые клубни, вымыть их и продезинфицировать в растворе марганцовки (0,5 грамма на 10 литров воды).

При посадке в качестве удобрения использовать птичий помёт (голубиный, куриный, перепелиный). Если помёт сухой, то в каждую лунку следует добавить примерно одну столовую ложку. Свежий помёт разводят в пропорции 1:10 и поливают уже посаженный картофель.

Для нематоды губительны выделения корней ржи, бархатцев, календулы, бобовых (бобов, фасоли, гороха), горчицы, клевера. До 90% личинок можно уничтожить, если в средине сентября на участке посеять рожь. Перед морозами поле следует перекопать, и перепревшая солома послужит прекрасным удобрением весной. Бобовые культуры, на корнях которых образуются клубеньки, содержащие азот, часто сажают между рядами картошки.

Естественные враги нематоды – кольчатые (дождевые) черви. Повышая плодородие почвы, вы одновременно создадите условия для размножения дождевых червей.

Если концентрация нематоды очень велика, можно использовать сильнодействующие токсичные химические препараты, к примеру, тионазин. Однако вносить эти средства необходимо строго по инструкции не позднее, чем за 6 недель до посадки.

Автор статьи:

агроном, профессиональный исследователь картофеля

КАК ПОБЕДИТЬ КАРТОФЕЛЬНУЮ НЕМАТОДУ: СЕМЬ ПРИНЦИПОВ ПРОФИЛАКТИКИ И БОРЬБЫ

Российские ученые дают рекомендации

  

Если в конце июня на ваших картофельных посадках появятся участки пожелтевших растений, скорее всего, посадки заражены одной из самых опасных болезней картофеля — глободерозом. Ее возбудитель — золотистая картофельная нематода (Globodera rostochiensis), крошечный круглый червь размером около миллиметра. Картофельная нематода живет и паразитирует на корнях, больные растения отстают в росте, бледнеют и увядают. Сегодня в Государственном каталоге пестицидов и агрохимикатов, разрешенных для применения на территории РФ, нет ни одного препарата для борьбы с картофельной нематодой. Бороться с нематодами особенно сложно, ведь их тело покрыто толстой оболочкой, которая защищает от химического воздействия. Поэтому главный метод борьбы с карантинным объектом — профилактика. Ее основные принципы довольно простые, но, чтобы сохранить урожай, нужно соблюдать их все.

1. Никогда не выращивайте картофель как монокультуру
Золотистая картофельная нематода переносится на большие расстояния и долгое время сохраняется в почве в виде цист — яиц или личинок с жесткой и стойкой оболочкой. «Если на картофельный участок попадает хотя бы одна циста и фермер не чередует картофель с другими культурами, через 7 лет болезнью будут поражены все растения, — утверждает лучший в России специалист по картофельной нематоде, профессор ВНИИ паразитологии животных и растений Александр Шестеперов. — Чтобы этого не случилось, фермер должен чередовать картофель с неподверженными болезни культурами — кукурузой, многолетними злаковыми травами, кормовым люпином». На зараженных нематодой участках картофель должен возвращаться на прежнее место не раньше, чем через 4 года, утверждает Шестеперов. Самые лучшие предшественники для картофеля — озимая рожь, бобово-злаковые смеси, кукуруза. «Для участков совсем маленькой площади, меньше 15 соток, для севооборота подойдет земляника, клубника, топинамбур, хрен, цикорий, шпинат, укроп», —добавляет профессор.
«В любом севообороте лучше выращивать устойчивые к нематоде сорта (на-пример, Жуковский ранний, Ред Скарлетт), но не больше 3—4 раз на одном и том же участке, — считает Жанна Емельянова, научный сотрудник Россель-хознадзора Орловской области. — Один год после этого нужно выращивать неустойчивый к нематоде сорт и повторять цикл снова. Это помогает предотвра-тить появление новых разновидностей паразита».

2. Выращивайте на одном участке одновременно ранне-, средне- и позднеспелые сорта
Если не забывать про этот принцип, то при любом климате можно получить стабильный урожай, полагают специалисты. Вред, который наносит картофельная нематода, всегда зависит от климата вашего региона. Что бы ни случилось, засуха или сильные дожди, если использовать набор сортов, на одном из них урожай обязательно будет высоким. По словам Александра Шестеперова, ранний картофель часто опережает в развитии нематоду, а поздние сорта всегда более толерантны к паразиту. Чаще всего позднеспелый сорт — это основной урожай, который хорошо хранится до лета следующего года. Наконец, среднеспелые сорта помогут подстраховать падение урожайности двух других сортов.

3. Проращивайте клубни при рассеянном свете
Для проращивания клубни укладывайте в один слой в светлых помещениях. Важно, чтобы свет был рассеянным: от прямых солнечных лучей ростки могут одревеснеть и погибнуть. По мнению фитопатолога, оптимальная температура для проращивания — 12—15 градусов, с ночным минимумом плюс 8 градусов и дневным максимумом плюс 18. «Через неделю после начала проращивания и за 7—10 дней до его окончания можно обрабатывать клубни 0,2%-м раствором медного купороса, расходуя около одного литра на каждые 100 кг клубней. Это повысит устойчивость растения к болезни», — говорит Александр Шестеперов.

4. Высаживайте только целые средние и крупные клубни
Вообще, посадка резаными клубнями допускается только в самом крайнем случае — при отсутствии посадочного материала. Когда вы сажаете мелкие и резаные клубни на глубину больше 10—15 см, у растения позже появляются всходы, оно становится более слабым и при первом поражении картофельной нематодой погибает. В крупных и средних клубнях (60—100 граммов) больший запас питательных веществ, и за счет этого растение развивает более мощную корневую систему и лучше противостоит паразиту. Если у вас есть только мелкие клубни, сажайте по два клубня в одно гнездо на глубину 7—10 см.

5. Мульчируйте междурядья соломенной резкой
Это позволит вам снизить температуру почвы, сохранить в ней влагу и замедлить развитие золотистой картофельной нематоды в засуху, советует фитопатолог. Кроме того, это создает более благоприятное освещение для листьев.

6. Позаботьтесь о магнии
«В ходе многочисленных опытов мы выяснили, что самое сильное поражение картофеля глободерозом всегда происходит на легких кислых почвах с недостатком магния, — утверждает Александр Шестеперов, — на таких почвах нужно вносить доломитовую муку — известь, содержащую магний. Также можно воспользоваться калимагнезией, карналлитом и, конечно, навозом». От дефицита магния снижается образование хлорофилла в листьях (они желтеют) и снижается устойчивость к болезням и различным стрессам. Как обращают внимание агрохимики, калий и магний — элементы-антагонисты, поэтому на бедных почвах внесение калийных удобрений вызывает дефицит магния.

7. Используйте некорневые подкормки
Напомним, нематода поражает корни, поэтому в очагах глободероза у картофеля всегда плохо развита корневая система и ему сложно добывать питательные вещества из почвы. Кроме того, паразиты блокируют для стеблей и листьев даже тот слабый поток питания, который все-таки достается корням. Поэтому самыми эффективными будут некорневые подкормки: уделите им внимание в самые уязвимые для растения периоды: бутонизации и цветения.

В подготовке статьи использовано практическое руководство «100 вопросов и ответов о получении урожая в очагах золотистой картофельной нематоды и других почвообитающих организмов» доктора биологических наук, профессора А. А. Шестеперова. Купить книгу вы можете в  агромагазине по сылке:http://www.agroxxi.ru/shop/agronomija/100-voprosov-i-otvetov-o-poluchenii-urozhaja-kartofelja-v-ochagah-zolotistoi-kartofelnoi-nematody-i-drugih-pochvoobitayuschih-vrednyh-organizmov.html

Способ борьбы с картофельной нематодой — Журнал «Агротехника и технологии» — Агроинвестор

phys.org

Журнал «Агротехника и технологии»

ноябрь – декабрь 2014

Читать номер

В настоящее время единственный способ борьбы с картофельной нематодой — очень токсичные химические препараты, использование которых часто бывает ограничено. Поэтому ученые из INECOL решили найти и разработать способы применения гриба-паразита этого вида нематоды, чтобы эффективно бороться с проблемой без применения химических препаратов.

По данным мексиканского Института экологии (INECOL), в отдельных частях Мексики картофельной нематодой заражено более 40% картофельных посевов. В среднем на картофельных фермах страны обнаружено до 6 тыс. цист картофельной нематоды на килограмм почвы. Тогда как, по информации Европейской организации защиты растений, максимальный уровень цист в почве не должен превышать 40 на килограмм, иначе значительная часть урожая будет потеряна.

Нематоды питаются микроэлементами, поглощаемыми корнями растений. В случае картофеля это приводит к уменьшению образования клубней. Вместо 8−10 клубней из-за нематод растение способно дать только 4−5, к тому же меньшего размера, чем обычно. Поэтому важно уменьшить концентрацию этого вредителя в почве.

В INECOL изучили горные районы происхождения картофеля (Мексика считается вторым после Перу центром происхождения этого растения) в поисках гриба-паразита нематоды. В 2005 году было найдено несколько потенциальных видов для дальнейших исследований. Из них был выбран один, уменьшающий популяцию нематод на 90% за два года.

В настоящий момент группа исследователей размножает этот вид вредителя нематод в биореакторе. По словам ученых, препарат может использоваться в любой стране, где есть картофельная нематода.
Источник: alphagalileo.org

Открыты законы передвижения нематод

Нематоды не перемещаются в почве беспорядочно, а прокладывают свой маршрут, ориентируясь на электрические поля, выяснили ученые отдела сельскохозяйственных исследований Министерства сельского хозяйства США (USDA). Нематоды являются паразитами многих насекомых-вредителей, что дает возможность использовать их для борьбы с этой проблемой.

Команда исследователей, возглавляемая энтомологом Дэвидом Шапиро-Иланом (David Shapiro-Ilan) и фитопатологом Кливом Боком (Clive Bock) обнаружили, что нематоду вида Steinernema carpocapsae привлекает электрический ток, пропускаемый через агар (препарат, получаемый из морских водорослей для размножения микроорганизмов) в чашке Петри. Основываясь на результатах этого опыта, ученые решили, что этот вид червей полагается на электричество или электрические поля для ориентирования в почве. В качестве гипотезы рассматривалось, что для этих же целей нематоды могут использовать магнитные поля.

Для проверки своего предположения ученые расположили магниты на противоположных сторонах чашки Петри с агаром и нематодами вида Steinernema carpocapsae.

Один магнит был ориентирован на Северный полюс, а другой — на Южный. В результате было замечено движение нематод преимущественно к Южному полюсу.

Передвижение в ответ на действие магнитных полей называется магниторецепцией. Оно может быть важным помощником при поиске пищи у различных организмов.

Ученые также проверили реакцию движения на электричество и магнитные поля шести других видов нематод, убивающих насекомых, и обнаружили, что их перемещения также не были случайными. Черви перемещались группами в одном направлении. Это поведение похоже на передвижение других животных, например косяков рыб и стай волков.

Ученые заключили, что такая способность нематод может быть использована для борьбы с насекомыми-вредителями и разработки новых программ биокотроля.

Источник: журнал Agricultural Research

Загрузка…

чем опасна и методы борьбы

Если листья картофеля стали вянуть и желтеть, а побеги и цветки деформировались, скорей всего растение поражено нематодой. Этот червячок повреждает корни, столоны, клубни и стебли растения. Самое важное — как можно раньше распознать вредителя и начать борьбу. О том, как определить поражение нематодой и вылечить картофель и почву, рассказываю в этой статье и привожу примеры. Нематода на картофеле — опасный вредитель. Избавиться сложно, а урожай можно потерять почти полностью.

Картофельная нематода

Все мы привыкли ассоциировать выращивание картофеля с борьбой с колорадским жуком, якобы страшнее вредителя на картофеле нет и быть не может. Химические средства борьбы также в основном ориентированы на борьбу именно с колорадским жуком, его личинками, на уничтожение яйцеклада, да и в статьях связанных с агротехникой картофеля обычно упоминается именно колорадский жук и борьба с ним.

На самом же деле порой даже опаснее колорадского жука на картофеле является нематода, это весьма опасный вредитель от которого, в отличие от колорадского жука, порой сложно, а иногда невозможно избавиться.  

Биология вредителя

Сама по себе нематода — это маленькие круглые черви-паразиты, их размеры можно считать микроскопическими.

Нематоды являются раздельнополыми организмами, это выяснили сравнительно недавно, ранее считалось, что нематода гермафродит. Форма тельца самок нематод округлая, они накапливают яйца. Ближе к концу теплого периода самки нематод гибнут, в результате образуется циста, имеющая довольно плотную оболочку. В дальнейшем из цисты выходят личинки.

Вообще жизненный цикл нематоды во многом зависит от вида, и заражение грунта происходит в течение нескольких теплых сезонов. 

На наш континент нематода была завезена, скорее всего, случайно из Южной Америки более 100 лет назад. В России нематода впервые замечена примерно в середине минувшего века и распространена она во всех без исключения регионах.

Виды нематоды

В мире насчитывается 20 видов нематод.

Для картофельного растения представляют опасность ряд видов нематоды:

• нематода стеблевая,
• нематода галловая,
• нематода золотистая,
• нематода листовая,
• нематода бледная.

Различия между этими видами нематод в их расцветке, в образе их существования, в месте обитания.

Нематода стеблевая

Имеет длину порядка 1,5 мм. Представляет серьезную опасность для картофеля, так как ее личинки проникают в столоны и клубни картофеля и вызывают деформацию стеблей, которые буквально раздуваются, поражают они также цветы и побеги. Циста этой нематоды может сохранять жизнеспособность до 5-и сезонов, оболочка ее максимально прочная и даже повышенные температуры не способны ее разрушить.

Нематода галловая

Поражает в первую очередь корневую систему картофеля. Взрослые особи на ранних стадиях своей жизнедеятельности имеют белую окраску, в дальнейшем они становятся прозрачными. Галловые нематоды присасываются к корневой системе растений, в результате чего на них образуются вздутия именуемые галлами, отсюда и название нематоды. В галлах яйцеклад нематоды, а в дальнейшем личинки.

Нематода бледная

Очень схожая с золотистой нематодой, она также формирует цисты, однако цвет цист не желтый, а буровато-коричневый. Эта нематода поражает листовые пластинки, что нарушает нормальное протекание процессов фотосинтеза и вызывает увядание, как отдельных листовых пластинок, так и целых кустов.

Нематода золотистая

Активно повреждает корневую систему, при этом она выделает токсины, которые являются максимально вредоносными для растений. Размножается эта нематода посредством цист, в каждой из которых насчитывается порой до 700 яиц.

У этого вида нематод цисты максимально прочны, они не погибают и не разрушаются ни под воздействием очень высоких температур, ни под воздействием низких температур, скажем, в зимний период. Даже радиация и традиционные инсектициды не способны разрушить цисты золотистой нематоды. Жизнеспособность цисты золотистой нематоды могут сохранять до 11 лет. 

Цисты золотистой нематоды можно обнаружить при выкопке кустов картофеля, визуализируются они как микроскопические шарики, имеющие золотистую окраску, число их порой очень велико.

ВАЖНО При выкопке кустов и обнаружении на них большого количества цист, нельзя пытаться их стряхнуть! Так вы только усугубите положение, и цисты попадут в почву.

Чем опасна нематода

Нематода активно поражает корневую систему картофеля, столоны, клубни. Способна без особого труда проникать в стебли.

1. Растения картофеля начинают отставать в росте, дают минимальный урожай,  а при сильном заражении погибают.
    
2. Пораженные нематодой клубни, как правило, начинают гнить. В пищу такие клубни не употребляют, и закладывать на хранение их бесполезно.
    
3. Кроме того, даже если нематода поразила растение незначительно, зачастую она переносит вирусную инфекцию. И если физический урон небольшой, то вирусы, переносимые нематодой, сделают свое дело и все равно погубят растение.

От картофельной нематоды можно потерять урожая не меньше, а иногда даже больше, чем от колорадского жука. Потери урожая нередко превышают 50% и доходят до 80%.

Опасность для растений максимальна, ибо полностью победить нематоду порой не удается, они довольно стойки к различным инсектицидам. Нематоды паразитируют они большей частью в той части растения, что расположена под поверхностью почвы, а это в разы затрудняет обработку и усложняет выявление и идентификацию вредителя.

ВАЖНО Нематода НЕ представляет опасности для человека

Как понять что картофель поразила нематода?

На самом деле обнаружить нематоду на картофеле на ранних стадиях довольно сложно, потому как обитает нематода под землей.

Зачастую огородники понимают, что растения картофеля поражены нематодой по ряду признаков:

• листовые пластинки начали желтеть, терять тургор,
• когда увядают уже сами растения,
• нередко заметны деформации на побегах и цветках картофеля.

Определить наличие нематоды по этим признакам можно, это плюс. Однако минус этого в том, что когда растения увядают, спасти их зачастую уже невозможно.

Максимально ранние признаки наличия нематоды на растениях картофеля —

1. резкое пожелтение краешков листовых пластинок, когда никаких иных предпосылок к этому нет,
    
2. далее говорить о наличии нематоды на растениях картофеля можно по даже легким деформациям и вздутиям на стеблях – это как раз признак стеблевой нематоды,
    
3. далее если заметите легкое увядание нижних листовых пластинок и побегов без иных причин, то это тоже говорит о наличии нематоды,
    
4. и если на картофеле неестественно мелкие бутончики и цветки, то это тоже может говорить нам о наличии нематоды на растениях.

Если растения картофеля в значительной степени поражены нематодой, то они могут не цвести вообще, при этом обычно наблюдается махровость ботвы картофеля.

Если выкопать такие растения, то на корневой системе их вы обнаружите утолщения – они говорят о наличии галловой нематоды, а вот если увидите шарики-цисты, то это говорит о наличии золотистой нематоды.

В случае сомнения советую обратиться к специалистам одной из контролирующих инстанций, так как нематода — опасный, карантинный вредитель. Своевременное обнаружение и уничтожение этого вредителя — залог дальнейшего полноценного культивирования картофеля на данном участке.

Как избавиться от нематоды на картофеле?

Зачастую победить нематоду на участке полностью – не удается, однако в ваших силах в разы сократить количество этого вредителя и свести численности нематоды на участке к минимуму.

Химические средства борьбы

Для эффективной борьбы с нематодой уместно применять инсектициды именно из группы нематоцидов.

1. Вполне можно применять препараты из группы контактных, такие как

• Карбофос,
• Линдан,
• Фосфамид.

2. Допустимо использовать фумиганты которые в виде газа проникают в организм вредителя и убивают его, это препараты:

• Хлорпикрин,
• Немагон,
• Карбатион.

Биопрепараты

Вполне допустимо использовать для борьбы с нематодой биологические препараты, однако их эффективность не очень велика и при сильном заражении почвы и растений нематодой они можно сказать не эффективны.

Это биопрепараты:

• Метаризин,
• Басамил.

Средства борьбы народные

Применять для борьбы с нематодой разного рода настои и отвары не эффективно, вы просто зря потратите свое время и силы, толку от них не будет никакого или он будет, но крайне мал. В данном случае биологические препараты будут гораздо эффективнее народных средств борьбы на основе отваров и настоев, а вреда окружающей среде от биологических препаратов также как от настоев и отваров причинено не будет.

Полив кипятком

Из народных мер борьбы, пожалуй, максимально эффективным будет использование кипятка для ошпаривания им почвы.

1. Используется для этого максимально крутой кипяток.
    
2. Почву необходимо взрыхлить и щедро полить ее кипятком.
    
3. Процедуру желательно повторить несколько раз, чтобы максимально обеззаразить почву и на максимально большую глубину.

Понятно, что обработку почвы путем пролива ее крутым кипятком уместно производить на небольших участках. А вот на больших участках, от 10 соток и более уместно применять именно химические препараты.

Бархатцы

Также бытует мнение, что запах бархатцев, отпугивает картофельную нематоду, так это или нет сказать сложно, но нет ничего проще высеять по периметру участка с картофелем бархатцы – красиво, и есть шанс, что нематода не появится или уйдет с вашего участка.

Как не допустить появление нематоды на картофеле?

Учитывая то, что нематода весьма стойкий и довольно живучий вредитель, следовательно, важно приложить все усилия по недопущению появления его на участке.

Агротехнические приемы как раз больше относятся к профилактическим мерам борьбы, нежели к полноценным защитным мероприятиям или мерам борьбы с вредителем.

1. Так, например, предупредительно-защитной мерой направленной на предупреждение появления нематоды и защиты клубней от ее атак является закладка в лунки при посадке картофеля луковой шелухи в количестве горсти.
    
2. 
    
3. На участках отдыхающих после выращивания на них картофеля рекомендую выращивать сидераты с соблюдением всех агротехнических приемов для той или иной сидеральной культуры.

1. Посадочный материал

К профилактическим мерам можно отнести посадку на участок исключительно здоровых клубней картофеля без малейших признаков наличия вредителя на их поверхности в виде цист или внутри в виде живых нематод.

Необходимо своевременно дезинфицировать посадочный материал картофеля, в особенности, если имеется риск его заражения или заражения почвы.

Естественно нужно пользоваться нематодоустойчивыми сортами картофеля,

1. из ранних культиваров это:

• Рикеа,
• Лига,
• Беллароза,
• Крепыш,
• Сандрин,
• Глория;

2. из среднеранних:

• Обрий,
• Доброчин,
• Гала,
• Сантэ;

3. из среднеспелых:

• Аврора,
• Янка,
• Гусар,
• Каскад;

4. из среднепоздних:

• Банафа,
• Рута,
• Тетерев;

5. из поздних:

• Вектар,
• Журавинка,
• Рагнеда,
• Воларе.

Эти культивары отмечаются тем, что при проникновении личинки в клубень у них начинают отвердевать ткани, буквально замуровывая вредителя в клубне, после чего личинки погибают. 

2. Севооборот

Следует соблюдать правила севооборота. К агротехническим мерам борьбы или защиты от нематоды картофеля можно отнести ежегодную смену участка, на котором планируется вырастить картофель.

Главное — не высаживать картофель на одном и том же участке десятки лет подряд, это приведет к неминуемому накоплению в почве бактерий, вирусов, различных вредителей включая нематоду.

3. Уход

Всегда производите своевременное окучивание растений картофеля, осуществляйте борьбу с сорной растительностью, поливайте растения картофеля, а при обнаружении зараженных растений – удаляйте их с участка и сжигайте за его территорией и ни в коем случае не помещайте в компостные кучи, помните, что цисты нематоды сохраняют жизнеспособность до 11-и лет.

Как итог можно сказать – нематода опасный, карантинный вредитель, только профилактика ее появления, грамотная и своевременная борьба с нематодой позволят исключить появление или свести на нет присутствие данного вредителя на вашем участке.

Н.В. Хромов

Нематода картофельная золотистая | справочник Пестициды.ru

Сводные данные
Благоприятная t (оC)	+ 15 – + 20
Мин. t развития (оC)	+12
Плодовитость (шт)	200 – 1000
Генераций в год	1 – 2
Яйцо (мм)	93 – 115 х 42 – 50
Личинка (мм)	Длина 366 – 570 мкм Ширина 18 – 26 мкм
Самка (мм)	Длина 380 – 1070 мкм Ширина 275 – 965 мкм
Самец (мм)	Длина 890 – 1270 мкмШирина – 31 – 46 мкм
Порог вредоносности	1 – 2 яйца на грамм почвы

Морфология

Имаго. Круглые черви, как все гетеродериды, отличаются резким половым диморфизмом.

Половой диморфизм.

Самка. Длина – от 380 до 1070 мкм, ширина – от 275 до 965 мкм. Отношение длины к ширине – 0,9:1,61. Длина стилета – 24–26 мкм. Длина шеи вульвы – 10 мкм. Расстояние от вульвы до ануса – 41 мкм.

Цвет самок жемчужно-белый, форма варьирует от полусферической до овальной. Шея удлиненная, торчащая. По мере развития цвет изменяется от белого до желтого и становится золотистым при переходе от стадии самки к стадии цисты.

Кутикула толстая, с неглубокими морщинами на поверхности. У молодых самок наружный слой кутикулы состоит из правильных кольцевых рядов точек, наиболее четко выраженных в анально-вульварной области. Самые крупные размеры они имеют вблизи вульвы.

Губная область слегка отделена от тела и имеет два кольца. Губная структура развита слабо.

Стилет довольно сильный. Форма варьирует от прямого до слегка изогнутого. Головки округлые, хорошо развиты.

Пищеводные железы часто скрыты, но внешне выглядят сгруппированными.

Выделительная пора заметна хорошо и всегда находится у основания шеи.

Вульва терминальная. Анально-вульварная пластинка циркумфенестрального типа.

Анальная фенестра отсутствует. Анус и вульва расположены в вульварной базине анально-вульварной области, не окруженной кутикулярными кольцами. Часто позади вульвы обнаруживаются сгруппированные вульварные тела различного размера и формы и большой поверхностный туберкул, собранные в группу около вульварной фенестры. Вульва эллипсоидная, анус короче вульвы. Все яйца сохраняются в теле цисты. Яйцевой мешок отсутствует.

[3]

Самец. Длина – 890–1270 мкм. Ширина – 31–46 мкм. Длина стилета – 25–28 мкм. Спикулы – 32–39 мкм. Губернакулум – 10–14 мкм. Хвост – 1,7–6,7 мкм. Кольца головы тонкие, их число варьирует от 5–6 до 8–9. Головная капсула развита хорошо. Стилет с массивными головками основания. Спикулы немного изогнуты, концы заостренные, зубчиков нет. До выделительной поры – 172,3 мкм, хвост – 5,4 мкм. Анальный диаметр тела – 13,5 мкм.

Тело червеобразной формы, слегка сужено с обоих концов. Кутикула имеет ясную кольчатость. Губная область немного отделена от тела, полусферической формы, с шестью кольцами. Губная структура сильно склеротизирована.

Стилет сильный, головки хорошо различимы.

Передние и задние цефалиды имеются. Боковое поле с четырьмя одинаково разделенными линиями. Средний клапан метакорпального бульбуса эллипсоидной формы. Выделительная пора находится на два кольца кутикулы позади хорошо видимого гемизонида. Половая трубка одна. Спикулы слегка дугообразные, с округлыми кончиками, незубчатые. Хвост короткий, по длине и форме различается у разных образцов.

[3]

Яйцо. Размер – 93–115 х 42–50 мкм. Отношение длины к ширине – 2,0:2,6.^[3]

Циста. Длина, не включая шею, – 450–990 мкм. Ширина – 250–810 мкм. Отношение длины к ширине – 0,9:1,8, диаметр фенестры – 8–20 мкм. Расстояние от края фенестры до ануса 29–116 мкм.

Цвет коричневый. Форма от овальной до сферической. Шея выступающая. Анально-вульварная пластинка циркумфенестрального типа, булле отсутствуют, вульварные тела отсутствуют.

Вульварная фенестра гораздо больше, чем анус. Последний находится в основании V-образной метки (складки кутикулы). Рисунок оболочки цисты такой же, как и у самок, но более отчетливый, особенно в середине тела. Субкристаллический слой отсутствует. Точечность имеется, но она неравномерна по интенсивности и расположению. Циста содержит от 200 до 1000 яиц.

[3]

Личинка инвазионная второго возраста. Длина – 366–570 мкм, ширина – 18–26 мкм. До экскреторной поры – 75,6–91 мкм, до клапана среднего бульбуса – 55–76 мкм. Стилет – 19,5–20,8.

Анальный диаметр тела – 10,4–11,7 мкм. Гиалиновый кончик хвоста личинки равен длине стилета – 19,5–27 мкм. Длина хвоста – 37–57 мкм.

Тело сужается с обеих сторон, но на заднем конце сильнее. Кольца кутикулы хорошо заметны. Боковое поле с четырьмя линями, наблюдающимися на большей части длины тела. Внешние две линии зазубренные, но без ареоляции.

Губная область слегка отделена от тела, имеет 4–6 колец. В основании губная область значительно шире, чем на переднем конце. По форме округлая, приплюснутая спереди.

Губная структура сильно склеротизирована. Стилет развит хорошо, с явными округлыми головками. Передние и задние цефалиды имеются.

Клапан среднего бульбуса эллипсоидной формы, виден хорошо. Истмус и пищевод имеют строение, типичное для рода Globodera.

Выделительная пора почти на одном уровне, но слегка позади гемизоида. Половой зачаток расположен слегка позади середины тела и состоит из 3–4 клеток: одна гемитативная и две-три соматические.

Хвост сужается к маленькому, округлому кончику. Фазмиды рассмотреть трудно, но часто они обнаруживаются в середине хвоста.^[3]

Фенология развития (в сутках)
Превращение	Полное
Полный цикл	38 – 48

Развитие

Имаго. Жизнедеятельность половозрелых особей проходит внутрикорневой системы растений. Оптимальная температура развития 15–20 °C.^[2]

Самка вырастает, становится полусферической или овальной, накапливает яйца внутри тела и постепенно превращается в цисту.^[3]

Самец не питается. В течение 10 дней находит самку, оплодотворяет ее и отмирает.^[3]

Период спаривания. Яйца остаются внутри самки. Одна самка производит от 200 до 1000 яиц.^[3]

Яйцо зимует в цисте.^[3]

Циста – отмершая самка с яйцами внутри. Легко отделяется от корней растения-хозяина и зимует в почве.^[3]

Личинка. Первая личиночная фаза проходит внутри яйца. Весной при температуре выше +12°C личинки, стимулируемые корневыми выделениями растений-хозяев, выходят из цист и заражают растения в течение всего вегетационного периода. Отродившись, личинки с помощью стилета проникают в корни и молодые клубни и превращаются здесь в половозрелых самок и самцов.^[2] Развитие золотистой картофельной нематоды аналогично превращению прочих родов из семейства разнокожих нематод (Heteroderidae).^[3]

Имаго. Самцы оплодотворяют самок и отмирают. Самки вырастают и прорывают наружный слой корневой коры и остаются прикрепленными к корешкам.^[2]

Особенности развития. Одно поколение при оптимальных условиях развивается в течение 38–48 суток. В полевых условиях обычно развивается только одно поколение вредителя, в оптимальных – два. Активному размножению и развитию нематоды способствует влажная погода с обильными осадками.^[2]

Географическое распространение

Золотистая картофельная нематода распространена практически по всей Европе. В ареал распространения входят Албания, Австрия, Болгария, Бельгия, Чехия, Хорватия, Кипр, Эстония, Дания, Франция, Финляндия, Германия, Греция, Исландия, Венгрия, Ирландия, Латвия, Литва, Люксембург, Нидерланды, Польша, Португалия, Россия (Смоленская, Брянская, Новгородская. Калининградская, Псковская, Московская, Калужская, Орловская области, Республика Татарстан и др).

Кроме того, вредитель распространен в Сербии, Словакии, Словении, Швеции, Англии, на Украине, в Африке, Алжире, а также в сибирских регионах России и Ливане.^[3]

Вредоносность

Золотистая картофельная нематода – опасный вредитель картофеля и объект внутреннего карантина в России. Угнетение пораженных растений начинается сразу после появления всходов. Листьев и стеблей образуется мало, а образовавшиеся желтеют и увядают. Жизнедеятельность личинок внутри корней приводит к нарушению поступления питательных веществ и воды в растения. Из-за этого клубни образуются мелкие, недоразвитые. В богатой, плодородной почве картофель поражается гораздо меньше.

Нематода поражает также томаты, баклажаны и сорняки из семейства пасленовых. ^[2]

Порог вредоносности находится в диапазоне 1–2 яйца на грамм почвы.^[3]

Нематоды разнокожие | справочник Пестициды.ru

Гетеродериды обладают высоким уровнем адаптации к корневому паразитизму, обеспечивающему гарантированные условия питания и защиты потомства от хищников и патогенных микроорганизмов в пределах цисты. Виды семейства способны сохранять жизнеспособность от года до десяти лет при отсутствии кормового растения.^[3]

История

Цистообразующие нематоды впервые были найдены ботаником Шахтом на Магдебургской равнине на корнях сахарной свеклы. Позднее Шмидт назвал эту нематоду Heterodera schachtiiв честь ученого, нашедшего ее.

В последующие десятилетия цистообразующие нематоды были зарегистрированы на многих других сельскохозяйственных растениях: овсе, ячмене, горохе, клевере, картофеле и прочих. Долгое время все находки относили к одному виду – Heterodera schachtii.

В дальнейшем были выделены различные расы свекловичной нематоды, а затем и отдельные виды.^[2]

Морфология

Имаго

Половозрелые особивсех представителей семейства Heterodera отличаются ярко выраженным половым диморфизмом.^[2]

Половой диморфизм

Самки в течение развития принимают шаровидную, лимоновидную или грушевидную форму. Они способны образовывать многочисленные яйца, преимущественно остающиеся в теле и защищенные оболочкой (цистой).^[2] Взрослые самкибелого цвета, неподвижные. Чаще всего на поверхности корня выступает часть или все тело самки. Передний конец тела всегда погружен в корень в месте питания.^[3]

Циста. Размер колеблется от 0,2 до 1, 1 мм. Окрас в зависимости от вида и возраста светло-, темно- или красно-коричневый. Оболочка состоит из трех слоев.^[2]

Самец.Тело стройное, длиной 1–1,5 мм. Хвост тупой, закругленный. Спикулы расположены вблизи кончика хвоста. Бурса отсутствует. У некоторых видов самцов нет и размножение происходит партеногенетическим путем.^[2]

Яйцо

Форма продолговато-овальное. Размер варьирует от 89 х 42 мкм у хмелевой нематоды до 122 х 48 мкм у злаковой нематоды. Яйца в начале развития заполнены зернистым содержимым, позднее оно дифференцируется постепенным дроблением до образования личинки.^[2]

Личинки инвазионные второго возраста

Длина – 0,4–0, 6 мм. Тело червеобразное. Обладают сильным ротовым стилетом и заостренным хвостом. Самые крупные – у овсяной и злаковой нематоды, самые мелкие – у капустной и хмелевой нематоды.^[2]

Развитие

Имаго. Развитие самцов и самок нематод в половозрелом возрасте различное.^[3]

Самка в начале развития имеет белую окраску. После откладки яиц самки отмирают и превращаются в цисту – выводковую камеру. Стенки цисты становятся прочными и темными. У некоторых видов проявляется коричневая окраска. Цисты покрыты субкристаллиновым слоем, состоящим из остатков личиночных оболочек. Позднее этот слой разрушается. Поэтому у некоторых видов они остаются белыми до момента его опадения.^[2]

Самец живет не дольше 10 дней. Не питается. После оплодотворения отмирает.^[3]

Период спаривания. Самцы оплодотворяют самок сразу после наступления половой зрелости последних, поскольку самки выделяют привлекающее вещество. У некоторых видов самцов нет и размножение проходит партеногенетическим путем. В течение месяца после оплодотворения самки откладывают яйца. Их количество колеблется от нескольких штук до нескольких сотен. Некоторые виды образуют желатиновый мешок, расположенный на вульварном конце цисты. В него также откладывается часть яиц.^[2]

Яйцо. Длительность эмбрионального развития зависит от условий окружающей среды и вида нематоды. ^[2]

Личинка. Развитие личинок протекает в несколько стадий.

Первая стадия протекает внутри яйцевой оболочки и завершает эмбриональное развитие. Поэтому цисты уже на ранних стадиях развития содержат многочисленные личинки первой стадии.

Вторая стадия. Личинки способны к передвижению и нападению на растения. Они выходят из цисты и свободно передвигаются в почве.

Личинки проникают в растение в основном сразу позади кончика корня. После этого их тело слегка утолщается. Вторая стадия завершается линькой через 1–2 недели после проникновения в растение.

Третья стадия. Личинка утолщается до бутылковидной формы. Половые органы заметны. Ректум виден ясно.

Четвертая стадия. Личинка, развивающаяся в самку, утолщается. Из-за этого корень разрывается и задний конец самки выступает наружу. Самки развиваются дольше самцов.

Будущие самцы приобретают червеобразную форму, перестают питаться. Развивающиеся самцы лежат в личиночной шкурке, сложенные многократно. Длится стадия 4–5 дней. Самцы выползают из шкурок и покидают корни.^[2]

Имаго. Самцы оплодотворяют самок и отмирают. Самки откладывают яйца в полость своего тела и превращаются в цисты.^[3]

Особенности развития. Длительность развития одного поколения и количество генераций зависит от вида нематоды, растения-хозяина и условий окружающей среды.^[3]

Географическое распространение

Семейство гетеродерид имеет широкое распространение. Представители этого семейства встречаются практически по всему миру.^[2]

Меры борьбы

Агротехнические методы

В открытом грунте

1. Введение в севооборот культур, не поражаемых нематодами.
2. Борьба с сорняками – хозяевами нематод семейства гетеродерид.^[2]

Механические методы

Применяются в теплицах.

1. Обеззараживание почвы путем выпаривания или вымораживания.
2. Предотвращение занесения нематод в незараженный грунт.
3. Полив чистой водопроводной водой.
4. Уничтожение пораженных частей растений.^[2]

Химические методы

Протравливание почвы нематицидами.^[1]

Нематода картофеля стеблевая | справочник Пестициды.ru

Сводные данные
Благоприятная t (оC)	+20 — +24
Мин. t развития (оC)	+ 3 – +5
Плодовитость (шт)	250
Генераций в год	До 9
Имаго (мм)	0,72 – 1,44
Самка (мм)	0,72 – 1,63
Размах крыльев (мм)	0,75 – 1,37
Порог вредоносности	20 – 50 личинок вредителя на 1 кг почвы

Морфология

Имаго. Круглый червь со стройным тонким телом размером 0,72–1,44 мм, у обоих полов с двух концов несколько суженым. При нагревании распрямляется. Наблюдается кольчатость кутикулы на уровне пищевода. Толщина колец – 1 мкм. Боковое поле с шестью инцизурами, их число уменьшается к головной и хвостовой частям. Головная шапочка отделена от тела и у́же его у основания. Опорный скелет головы и стилет тонкие. Головки стилета закругленные. Проток дорсальной железы расположен на расстоянии 2–4 мкм от основания стилета. Метакорпальный бульбус овальный и занимает до половины ширины тела на своем уровне. Нервное кольцо расположено на уровне основания истмуса.

Выделительная пора – на уровне задней половины кардинального бульбуса.

Размеры гемизонида – от 2 до 5 мкм. Он располагается на 4–11 мкм впереди выделительной поры.

Пищеводные железы слегка налегают на кишечник с дорсальной стороны. Кишечник полупрозрачен.^[3]

Половой диморфизм

Самка. Длина – 0,72–1,63 мм. Начало яичника достигает основания пищевода. Оогонии в герминативной зоне расположены в 2–3 ряда. Ооциты в зоне роста – в один ряд. Преутеральная железа относительно коротка, состоит из четырех рядов клеток по шесть клеток в ряду. Задняя матка ровная или чуть длиннее половины расстояния вульва – анус. Губы вульвы выступающие. Анус и ректум наблюдаются хорошо. Кончик хвоста притуплен.^[3]

Самец. Длина – 0,75–1,37 мм. Половая трубка обычно прямая, короче, чем у самки, и не достигает основания пищевода. Бурса развита хорошо, начинается на уровне основания спикул и не достигает кончика хвоста, оставляя его свободным.^[3]

Яйцо покрыто сложной многослойной оболочкой и содержит небольшое количество яйца в цитоплазме. Длина яиц слегка больше диаметра тела самки. Форма удлиненно-овальная или почковидная.^[3]

Личинка. Сформировавшаяся личинка похожа на взрослого червя. Отличается недоразвитой половой системой. Имеется мощный наружный скелет в виде кутикулы.^[3]

Фенология развития (в сутках)
Превращение	Неполное
Полный цикл	18 – 68

Развитие

Имаго. Заражение молодых клубней картофеля происходит в почве в период вегетации от зараженного маточного клубня. Нематода через столоны (подземные части стеблей картофельного куста, на которых образуются клубни) проникает в клубень в период его формирования. Иногда заражение может произойти через почву или в месте повреждения клубня проволочниками (личинками жуков-щелкунов).

Повышенная влажность почвы значительно увеличивает риск заражения клубней. При влагоемкости 40 % поражается только 10 % клубней, но уже при 60 % влагоемкости – 62,8 % клубней, а при 80 % – до 90 %.^[2]

Период спаривания. В матке самки синхронно может развиваться не больше двух яиц, но общая плодовитость достигает 250 шт. Самка откладывает яйца внутри тканей растения-хозяина, предпочтительно в подземной его части, в частности в клубнях картофеля.^[3]

Яйцо. Дробление полное, равномерное. Может начинаться еще в половых путях самки либо сразу после откладки яйца во внешнюю среду.^[3] Яйца хорошо переносят промерзание почвы и переживают зимний период.^[2]

Личинка. Развиваются четыре личиночных стадии. Рост личинки происходит за счет линьки.^[2] В анабиоз не впадает, но может переживать зимний период в теплом климате или овощехранилищах в тканях растения-хозяина.^[3]

Имаго. С завершением развития рост нематоды замедляется, но не заканчивается. Постоянные размеры сохраняются только у твердых органов (стилета, спикул и копья).^[3]

Особенности развития. Нижний температурный порог развития – + 3–5 °C. Самки откладывают яйца в интервале между + 5 °C и +37 °C. Оптимальная температура развития – +20–24 °C. В зависимости от температуры на развитие одной генерации может уходить от 20 до 45 дней.^[3] При температуре 6–10 °C длительность развития одного поколения увеличивается до 68 дней.^[2] При оптимальных температурах развитие генерации занимает не больше 24 дней.^[3] В районе Алма-Аты в течение вегетационного периода развивается 6–9 генераций, при этом меньше генераций в горной зоне и больше в предгорьях.^[2]

Морфологически близкие виды

По морфологии (внешнему виду) имаго к описываемому виду близка Cтеблевая нематода лука (Ditylenchus dipsaci). Главные отличия стеблевой луковой нематоды: число боковых линий к голове и хвосту уменьшается до двух, кончик хвоста заострен; пищеводные железы не перекрывают начало кишки и отделены от него горизонтально; ооциты расположены в один ряд; длина задней матки до половины расстояния вульва – анус. Кроме того, яйцо в два-три раза длиннее ширины тела самки.^[2]

Кроме указанного вида часто встречается Стеблевая нематода бодяка (Ditylenchus weischeri), Люцерновая стеблевая нематода (Ditylenchus medicaginis) и другие представители рода Ditylenchus, также схожие по морфологии имаго со стеблевой нематодой картофеля (Ditylenchus destructor).^[2]

Географическое распространение

Стеблевая нематода картофеля впервые была описана в 1888 году в Голландии, но тогда ее приняли за стеблевую нематоду лука. Только в 1945 году было установлено морфологическое различие между этими двумя близкими морфологически видами. Вид обнаружен во многих странах мира: Германии, Голландии, Франции, Великобритании, Австрии, Дании, Швеции, Болгарии, Польше, Венгрии, Швейцарии, США и Канаде.^[2]

Вредоносность

Стеблевая картофельная нематода повреждает растения в период вегетации и клубни в хранилищах. В тканях клубней под кожурой образуются мелкие пятна белого цвета с отверстиями в самой середине. Пораженные участки становятся мягкими и обнаруживаются при прощупывании. Впоследствии ткань буреет, и места поражения выглядят как слабо вдавленные серовато-бурые пятна. В дальнейшем кожица над пятнами становится тонкой и часто трескается, обнаруживая под собой сухую крошащуюся массу.

На границе большой и здоровой ткани находятся все стадии развития нематод: яйца, личинки, имаго.

Пораженные клубни сморщиваются и загнивают, а затем полностью уничтожаются грибами и бактериями. Это приводит к значительным потерям урожая. К растениям-хозяевам нематоды относятся морковь, томат, огурец, тыква, перец, баклажан, лук, арбуз, клевер, люцерна, многие сорные растения и некоторые декоративные.^[1]

При правильном хранении картофеля заражение не происходит, здоровые клубни заражаются только при повышенной влажности в хранилищах. Однако при хранении вредитель развивается за счет клубней, зараженных в период вегетации.^[3]

Порог вредоносности устанавливается при наличии 20–50 личинок вредителя на 1 кг почвы.^[3]

Пестициды

Для опрыскивания в процессе вегетации:

Универсальные системные инсектициды:

Меры борьбы

Агротехнические мероприятия

• Использование незараженного посадочного материала.
• Первоочередное использование зараженных клубней.
• Закладка на хранение только здоровых клубней.
• Ранние сроки уборки.
• Качественная уборка картофеля (без потерь).
• Соблюдение севооборота.
• Уничтожение сорняков.
• Применение минеральных удобрений.^[2]

 

При написании статьи также использовались следующие источники:^[4]

Статья составлена с использованием следующих материалов:

Литературные источники:

1.

Васильев В.П. Вредители сельскохозяйственных культур и лесных насаждений в трех томах. Том I. Вредные нематоды, моллюски, членистоногие (часть первая). Коллектив авторов. Под ред. акад. В.П. Васильева. К., «Урожай», 1973, стр. 496 с. ОК

2.

Деккер Х. Нематоды растений и борьба с ними (фитонематология). Перевод с немецкого. JI. А. Гуськовой, О. В. Лисовской, О. 3. Метлицкого, Т. В. Покровской, Т. Г. Терентьевой Общая редакция кандидата биологически наук Свешниковой Н.М. —  Москва.: Колос, 1972. — 444 с.

3.

Зиновьева С.В., Чижов В.Н. Фитопаразитические нематоды России Монография. — Москва.: КМК, 2012. — 385 с.

Источники из сети интернет:

4.

Агроатлас. http://www.agroatlas.ru/

Изображения (переработаны):

5.

Воловик А.С. Болезни и вредители картофеля. Воловик А.С., Шмыгля В.А. М.: Россельхозиздат, 1974. 136 с., илл. Иллюсрации из книги. ©

Свернуть Список всех источников

Руководство по борьбе с вредителями / Программа IPM UC в масштабе штата (UC IPM)

Описание вредителя

Нематоды, паразитирующие на растениях, представляют собой микроскопические круглые черви, питающиеся корнями растений. Они живут в почве и тканях растений, и в поле может встречаться более одного вида. У них широкий спектр хозяев, они различаются по своим экологическим требованиям, симптомам, которые они вызывают, и риску для картофеля.

Урон

Зимующие молодь узловатой нематоды проникает в корни, а затем и в клубни, устанавливает места питания и развивается во взрослую стадию.Взрослые самки опухшие, сидячие и откладывают яйца в студенистой матрице на поверхности корня или чуть ниже. Молодые особи второй стадии (J2) вылупляются из этих яиц и перемещаются по почве, вторгаясь в другие корни и клубни. Когда нет урожая, нематоды выживают в виде яиц или J2, которые можно найти в почве. Подкормка корневых нематод снижает жизнеспособность растений и вызывает появление пятен на клубнях. Последнее может привести к серьезному ухудшению качества клубней, в результате чего пораженный картофель становится неликвидным.Пораженные нематоды повреждают корни, питаясь и перемещаясь по кортикальным тканям. Кроме того, Pratylenchus Penetrans повышает восприимчивость растений картофеля к вертициллезному увяданию и вызывает появление пятен на клубнях. Pratylenchus neglectus обычен на картофельных полях, но не было доказано, что он повреждает картофель в Калифорнии. Короткие корневые нематоды питаются поверхностями корней, что может привести к образованию множества коротких корней. О потере урожайности не сообщалось. Основной проблемой, вызываемой этим видом нематод, является передача вируса табачной погремушки, который вызывает болезнь кольцевой пятнистости на развивающихся клубнях.

Симптомы

Описанные ниже симптомы указывают на нематоду. проблемы, но не являются диагностическими, потому что они могут возникать по другим причинам, например Что ж. Как правило, наземные симптомы включают низкорослость, пожелтение, хлоротик, и / или мертвые растения. Зараженные растения могут раньше увядать под температурный или влажный стресс. Заражение может происходить без каких-либо надземных симптомы.

При кормлении узловатой нематодой на корнях появляются характерные вздутия, называемые галлами.Галлы, вызванные Meloidogyne chitwoodi , маленькие и их трудно увидеть. На сильно зараженных растениях яичная масса выглядит как крошечные круглые бугорки на кормовых корнях. Meloidogyne hapla вызывает небольшие отчетливые галлы с разрастанием боковых корней вокруг этих галлов. Meloidogyne incognita вызывает более выраженные галлы. Все три вида Meloidogyne и Pratylenchus Penetrans вызывают неровности, бородавки или крестообразные трещины на поверхности инфицированных клубней.Однако те, что вызваны M. hapla , менее отчетливы. Внутри клубней образуются коричневые пятна, в основном на наружных 0,25 дюйма (6 мм), которые становятся видны при снятии тонкого слоя клубня. Пораженные нематоды вызывают красновато-коричневые поражения на корнях, которые позже становятся черными. Короткие корневые нематоды вызывают многочисленные короткие и низкорослые (укороченные) корни и симптомы корковой кольцевой пятнистости на клубнях, если нематода является переносчиком TRV.

Полевая оценка

Для принятия управленческих решений важно знать существующие виды нематод и оценки их численности.Если предыдущий урожай имел проблемы, вызванные нематодами, которые также перечислены как вредители картофеля, их количество может быть достаточно высоким, чтобы нанести ущерб последующим посевам картофеля. Образцы почвы необходимо отправить в диагностическую лабораторию для подсчета и идентификации.

Взять пробы почвы осенью из корневой зоны предыдущий урожай после сбора урожая или, желательно, непосредственно перед сбором урожая. Разделите поля на участки для отбора проб не более пяти соток. Каждый блок должен быть репрезентативные для истории посевов поля, травм урожая или текстуры почвы.Произвольно возьмите несколько подвыборок из блока, тщательно их перемешайте и сделайте составной образец объемом около 1 кварты (1 литр) на каждый блок. (См. UC ANR Публикация 3316, Интегрированная Для получения более подробной информации см. «Борьба с вредителями картофеля», № ). Разместите образцы отдельно. полиэтиленовые пакеты, заклейте их и наклейте снаружи этикетку со своим именем, адрес, местоположение и текущая / предыдущая культура и культура, которую вы собираетесь расти. Храните образцы в прохладном месте (не замораживайте) и транспортируйте их как можно скорее. в диагностическую лабораторию.Обратитесь к консультанту вашего хозяйства, чтобы помочь вам найти лабораторию по извлечению и идентификации нематод, а также за помощью в интерпретация результатов выборки.

Менеджмент

Meloidogyne chitwoodi , колумбийская нематода узелкового узла, нанесла значительный ущерб урожаю на почвах с высоким содержанием органического вещества при низкой плотности в графствах Модок и Сискию. На полях, где эта нематода-завязь является проблемой, необходимы долгосрочные комплексные методы управления, такие как севооборот, культурный контроль, фумигация и нематициды, чтобы предотвратить существенное обесценивание урожая из-за образования пятен на клубнях, вызванных нематодами.

Фумиганты (метаматрий и 1,3-дихлорпропен) и нефумигантные нематициды (этопроп и оксамил) являются вариантами химического контроля для минимизации повреждения сельскохозяйственных культур нематодами корнеплодов Columbia в почвах с низким содержанием органических веществ. Однако в илистых суглинках с высоким содержанием органических веществ, когда количество корневых узлов Columbia превышает 500 молодых особей второй стадии (J2) на 1000 кубических сантиметров почвы, ни 1,3-дихлорпропен, ни метамнатрий не обеспечивают приемлемых уровней контроля.

Следующая тактика борьбы с узловатой нематодой Columbia может повысить эффективность в почвах с высоким содержанием органического вещества):

• Комбинация фумигации (1,3-дихлорпропен) и применения нефумиганта нематицида (оксамила) может быть эффективной.Однако использование этой комбинации не было проверено в Калифорнии на почвах с высоким содержанием органического вещества.
• Метам натрия разбрызгивается и сразу же вносится с помощью роторного культиватора. (На основе исследования за один год.)
• Многократное введение 1,3-дихлорпропена или метамнатрия в глубину

Для других видов нематод нет точных указаний по экономическим пороговым уровням в условиях выращивания сельскохозяйственных культур в Калифорнии. Поля, зараженные короткокорневыми нематодами и вирусом табачной погремушки, были обнаружены в округах Монтерей и Керн, а также в районе Санта-Мария округа Санта-Барбара.Поля с известными вирусными заражениями не следует засеивать картофелем без наличия эффективной стратегии борьбы с нематодой с короткими корнями, которая может передавать вирус, вызывающий кольцевую пятнистость у картофеля.

Профилактика

Следующие меры помогут предотвратить распространение нематод на незараженные поля: (1) использование сертифицированного посадочного материала; (2) очистка оборудования от почвы перед перемещением между полями; (3) удержание поливной воды в пруду для выдержки что любые присутствующие нематоды могут оседать и откачивать воду из поверхность водоема; (4) предотвращение / сокращение перемещения животных от заражения до незараженные поля; и (5) компостирование навоза для уничтожения нематод, которые могут присутствовать, прежде чем применять его к полям.

Севооборот

Севооборот может быть полезен для сокращения численности нематод, за исключением нематод короткокорневой и вируса табачной погремушки, которые имеют широкий спектр хозяев, и поэтому севооборот нецелесообразен. Люцерна не является хозяином M. chitwoodi, Race 1; злаки не являются хозяевами M. hapla; и есть несколько устойчивых к нематодам сортов томатов, которые можно использовать, если M. incognita представляет собой проблему.Исследования, проведенные на северо-западе Тихого океана, показали, что покровные культуры рапса, горчицы, масличной редьки или суданграсса уменьшают количество корневых нематод при внесении их в качестве сидерата. В настоящее время нет доступных сортов картофеля, устойчивых к нематодам. Информацию о борьбе с нематодой, вызывающей завязку корня Columbia, можно найти на веб-сайте UC Nematology.

Культурный контроль

Поля, оставленные под паром, но очищенные от сорняков, обычно имеют от 80 до 90% годовое сокращение популяций узловатых нематод.Зараженные клубни остались в поле после сбора урожая может быть источником инокулята. Уничтожьте растения картофеля, которые впоследствии выходят из этих клубней, чтобы ограничить размножение нематод. Избегать хранение клубней, инфицированных M. chitwoodi , поскольку во время хранения могут увеличиваться пятна.

	Общее название	Количество на акр	REI ‡	PHI ‡
	(Пример торгового наименования)		(часы)	(сутки)
Меры предосторожности в отношении пестицидов Берегите воду Рассчитать летучие органические соединения Защитите пчел
Перечислены не все зарегистрированные пестициды.Ниже перечислены пестициды, имеющие наибольшее значение IPM, перечисленные первыми — наиболее эффективные и с наименьшей вероятностью вызывают резистентность находятся в верхней части таблицы. При выборе пестицида учитывайте информацию, касающуюся свойств пестицида и сроков его применения, медоносных пчел и воздействия на окружающую среду. Всегда читайте этикетку используемого продукта.
ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ УСТАНОВКА
А.	МЕТАМ НАТРИЯ * §
	(Vapam HL)	37,5–75 галлонов	См. Этикетку	NA
	(Сектагон 42)	30–75 галлонов	См. Этикетку	NA
	КОММЕНТАРИИ: Обратитесь к консультанту вашего хозяйства за советом о наиболее эффективном методе внесения в конкретной ситуации.Фумиганты, такие как метамнатрий и 1,3-дихлорпропен, являются основным источником летучих органических соединений (ЛОС), которые представляют собой серьезную проблему для качества воздуха.
Б.	ЭТОПРОП *
	(Mocap EC)	Максимальная скорость этикеток	См. Этикетку	NA
	КОММЕНТАРИИ: Свяжитесь с консультантом вашего хозяйства для получения информации о максимальной эффективности этого материала.
С.	1,3-ДИХЛОРОПРОПЕН * §
	(телефон II)	Маркировка	См. Этикетку	NA
	КОММЕНТАРИИ: Помогает контролировать поражение нематодой, связанной с вертициллезным увяданием, и нематодой с короткими корнями, вызывающей кольцевую пятнистость. Фумиганты, такие как метамнатрий и 1,3-дихлорпропен, являются основным источником летучих органических соединений (ЛОС), которые представляют собой серьезную проблему для качества воздуха.
Д.	ОКСАМИЛ *
	(Vydate C-LV)	Маркировка	48	7
	РЕЖИМ ДЕЙСТВИЙ НАЗВАНИЕ ГРУППЫ НОМЕР 1 ): 1A

‡	Ограниченный интервал входа (REI) — количество часов. (если не указано иное) от лечения до тех пор, пока обрабатываемый участок не будет безопасно вошел без защитной одежды.Интервал до сбора урожая (PHI) — это количество дней от обработки до урожай. В некоторых случаях REI превышает PHI. Самый длинный из двух интервалов — это минимальное время, которое должно пройти до сбора урожая.
*	Требуется разрешение от уполномоченного по сельскому хозяйству округа для покупки или использования.
NA	Не применимо
§	Не превышайте максимальные нормы, разрешенные в соответствии с требованиями к ограниченному использованию материалов Калифорнийского свода правил, которые могут быть ниже максимальных норм, указанных на этикетке.

Руководство UC IPM по борьбе с вредителями: картофель
Публикация ANR UC 3463

Б. Б. Вестердал, нематология, Калифорнийский университет в Дэвисе

Благодарность за вклад в развитие нематод

U.C. Кодира, нематология, Калифорнийский университет в Дэвисе

Текст обновлен: 19.08.

Таблица лечения обновлена: 19.08.

Картофель (Solanum tuberosum) нематод, корнеплод | Справочники по борьбе с вредителями на северо-западе Тихоокеанского региона

Автор: R.Э. Ингхэм, П. Б. Хэмм и К. М. Окамб

Причина Северные (Meloidogyne hapla) и колумбийские (M. chitwoodi) узловатые нематоды являются одними из наиболее серьезных проблем при выращивании картофеля. Очень низкая заселенность почвы может привести к значительному ущербу. Обе нематоды портят клубни и могут сделать их нерентабельными. M. chitwoodi более важен, чем M. hapla, вызывая более серьезные повреждения клубней. Оба являются малоподвижными эндопаразитами, и в почве присутствуют только молодые особи второй стадии (инфекционная стадия) и взрослые самцы (которые могут быть редкими).Болезнь распространяется через инфицированные клубни (семенные или товарные), повторно использованную поливную воду и через почву. M. chitwoodi продолжает развиваться при температуре выше 41 ° F, но M. hapla не активна при температуре ниже 50 ° F. M. chitwoodi может мигрировать на глубину от 3 футов, особенно на песчаных почвах, и вызывать экономически значимое повреждение клубней.

Симптомы Инфекция корневых нематод редко вызывает наземные симптомы у картофеля. Внешними симптомами M. chitwoodi являются отчетливые прыщики на клубнях. М.hapla обычно вызывает более общее вздутие клубня или его отсутствие. Оба вида образуют коричневые пятна внутри сосудистого кольца в пределах 0,25 дюйма от поверхности клубня. Коричневые пятна имеют диаметр около 0,04 дюйма (1 мм) и видны только тогда, когда самка нематоды начинает яйценоскость. Белое тело самки и яйцеклетку, содержащую яйца (яичная масса), произведенные вне тела, часто можно увидеть через ручную линзу в центре коричневого пятна. Если несколько нематод не находятся в одной области, границы пятен четкие.Пятна не следует путать с симптомами теплового некроза, при котором образуются пятна аналогичного размера, но более расплывчатые. Клубни, инфицированные M. chitwoodi в конце сезона, могут не проявлять видимых внешних или внутренних симптомов при сборе урожая, но могут развиваться при хранении.

Отбор проб Рекомендуется отбор проб почвы. Взять пробу почвы перед посадкой картофеля, если она не промерзшая, не слишком сухая или влажная. Однако лучше всего отбирать образцы в конце лета или в начале осени, когда численность нематод выше, чем ранней весной.Зимой популяции нематод естественным образом сокращаются. Таким образом, малые популяции осенью могут не обнаруживаться весной. Это очень важно, потому что низкие популяции M. chitwoodi (менее одного на 250 куб. См почвы) могут привести к серьезным экономическим потерям. Глубина отбора проб может иметь важное значение, особенно после глубоко укоренившихся культур, таких как люцерна и кукуруза. Отобрать пробы почвы до и после фумигации почвы, чтобы определить эффективность обработки; однако не следует брать пробы в течение 2 недель после лечения.Укажите, являются ли образцы до или после обработки, чтобы можно было различить живых и мертвых нематод. Стратегии борьбы могут зависеть от вида нематоды, вызывающей завязку, поэтому запросите идентификацию вида при отправке образца.

Культурный контроль

• Используйте только сертифицированные семена, проверенные на нематод.
• Не возвращайте на ферму грязь от тары картофеля или других культур.
• Избегайте перемещения почвы с зараженных ферм или полей путем очистки машин и оборудования.
• Избегайте использования сточных вод для полива. Отстойные пруды сокращают распространение нематод; нематоды оседают на дно и в конечном итоге умирают. Откачайте воду из-под поверхности воды.
• Используйте культуры, не являющиеся хозяевами, такие как зерновые, в чередовании с картофелем, чтобы подавить или минимизировать рост популяции M. hapla. Большинство севооборотных культур, особенно зерновые, являются хорошими хозяевами для M. chitwoodi, но короткосерийные культуры, такие как пшеница или сладкая кукуруза, сокращают количество поколений M. chitwoodi по сравнению с многолетними культурами, такими как кукуруза.Посевы с коротким сезоном также могут дать время для посадки сидератов (см. Последние меры контроля культуры ниже) в конце лета. При чередовании выращивания кукурузы и пшеницы, выращивание кукурузы в один год, а затем пшеницы в следующий, увеличивает популяции M. chitwoodi в меньшей степени, чем пшеница, за которой следует кукуруза. Выращивание фасоли лимской с последующим посевом зеленых удобрений за год до картофеля может заметно снизить уровень M. chitwoodi. Зеленый горошек можно сажать перед фасолью, чтобы получить дополнительный доход. M. chitwoodi имеет две расы, в одной из которых люцерна является хозяином (раса 2), а в другой люцерна не является хозяином (раса 1).Люцерна может подавлять образование корневого узла, если присутствует только раса 1 M. chitwoodi, но не в присутствии смешанной популяции рас 1 и 2, или если присутствует M. hapla.
• Борьба с сорняками в ротационных культурах имеет решающее значение, потому что многие сорняки являются подходящими хозяевами для нематод, вызывающих завязку.
• Планируйте ранний сбор урожая на полях, зараженных M. chitwoodi, даже при соблюдении надлежащих мер борьбы. Собирайте урожай как можно скорее после гибели виноградной лозы. Не оставляйте клубни в земле на долгое время после гибели лозы.
• Избегайте хранения клубней, собранных с поля, зараженного M. chitwoodi.
• Зеленые удобрения, такие как суданграсс («Трудан 8» или «Сордан 79») и рапс («Гумус»), эффективно подавляют популяции нематод. Их выращивают в начале августа после короткосезонных культур, таких как пшеница или сладкая кукуруза. Суданграсс вносится осенью перед заморозками, рапс весной за 3–4 недели до посадки картофеля. M. chitwoodi подвергается адекватному контролю, когда вместе с этими сидеральными культурами применялись химические средства борьбы.Разрабатываются новые сидеральные культуры. Обратитесь к местному агенту по расширению, чтобы получить информацию о характеристиках доступных в настоящее время разновидностей.

Химический контроль Ни один метод контроля никогда не устраняет нематод из почвы, и в конечном итоге они заражают клубни. Тем не менее, эти рекомендации показали свою эффективность для снижения воздействия болезни при правильном использовании фунгицидов и соблюдении рекомендаций по отбору проб почвы.

• Фумигация почвы осенью настоятельно рекомендуется, но весенняя фумигация возможна при соблюдении критериев условий фумигации.Обычно температура почвы и влажность для фумигации лучше осенью, чем весной. Кроме того, популяции нематод более активны осенью и, следовательно, более восприимчивы.
  • Метам натрия (Vapam HL, Sectagon 42) может уменьшить популяции нематод. На некоторых полях метамнатрий, внесенный с помощью разбрызгивателя (1 дюйм воды), не может адекватно уменьшить количество нематод на глубине 2–3 футов в почве. Для лучшего контроля нанесите метамнатрий в виде распыляемого распылителя на глубину от 14 до 16 дюймов, используя плуг Noble или аналогичные стойки с прикрепленными распылительными насадками, с соответствующей скоростью, специально предназначенной для борьбы с нематодами, а не с почвенными грибами.Затем наносят метамнатрий на поверхность с помощью разбрызгивателя или распыляют на поверхность и вводят диском на глубину от 4 до 6 дюймов. Пестициды ограниченного использования. 48-часовой повторный вход.
  • Telone II от 9 до 14 галлонов / А для минеральных почв, 18 галлонов / А для навозных почв. 5-дневный повторный вход. Пестициды ограниченного использования.
  • Telone C-17 при 24 галлонах / А для минеральных почв и 30 галлонах / А для навозных почв. 5-дневный повторный вход. Пестициды ограниченного использования.
• Mocap EC в количестве от 1 до 2 галлонов / А для контроля M. hapla и подавления M.Читвуди. Для достижения наилучших результатов с M. chitwoodi используйте Mocap EC из расчета 2 галлона / A в сочетании с фумигацией почвы. Mocap EC защищает обработанный участок от мигрирующих нематод в течение 5-6 недель. Рассыпьте Mocap EC как можно ближе ко времени посадки и сразу же заделайте верхний слой почвы на 2–4 дюйма роторным ротором или дисковым методом. Наилучшие результаты достигаются при глубоком (от 6 до 8 дюймов) равномерном заделке. Для M. chitwoodi Mocap EC следует применять после осеннего или весеннего внесения зарегистрированного фумиганта нематицида.В бассейне реки Колумбия настоятельно рекомендуется применять Mocap EC после осеннего или весеннего внесения зарегистрированного фумиганта нематицида. При сильном заражении или в условиях длительного вегетационного периода Mocap EC может не обеспечить адекватную защиту качества клубней. 48-часовой повторный вход; 72-часовой повторный вход при среднем количестве осадков менее 25 дюймов в год.
• Return XL (группа 1A) от 34 до 68 жидких унций / A. См. Этикетку для программ лечения. 48-часовой повторный вход. Пестициды ограниченного использования.
• Vydate C-LV можно использовать для подавления повреждения клубней нематодами корневых узлов.Рекомендуется внесение в борозду при посеве. Пестициды ограниченного использования. Для достижения наилучших результатов используйте Vydate в сочетании с почвенным фумигантом. Всегда перед Vydate вводите фумигант, введенный в черенки, если предпосевные популяции M. chitwoodi превышают 50/250 куб. См почвы. Для адекватной защиты требуется несколько приложений Vydate. Модель «градус-день» (DD) была разработана для оптимизации сроков подачи заявок.

Мониторинг градусо-дней: градусо-дни (DD) почвы должны контролироваться полевыми регистраторами данных, размещенными на глубине от 6 до 8 дюймов в ряду для картофеля.Накопление DD начинается при посадке и начинается с 41 ° F (5 ° C). Чтобы вычислить DD в градусах Фаренгейта, возьмите среднесуточную температуру почвы (добавьте дневной максимум + дневной минимум, а затем разделите на 2), а затем вычтите 41, что даст значение DD для этого дня. Добавьте дневную кумулятивную DD с даты посадки, чтобы отследить общую DD.

• Используйте следующий график внесения для оптимальной производительности.
  • 2,1-4,2 пинты / акр в борозде при посеве
  • 2,1 пинты / акр при всходе урожая
  • 2.1 пинта / акр при 1440 градусо-днях (800 DD ºC)
  • 2,1 пинты / акр 14 дней спустя
  • Продолжайте вносить 2,1 пинты / акр каждые 14 дней до 7 дней перед копанием.
  • Для достижения наилучших результатов все внесения, кроме внесения в борозду, следует выполнять химическим способом.
  • См. Этикетку производителя для получения подробной информации о применении через спринклерные оросительные системы.
  • Всегда буферизируйте раствор для инъекций Vydate до pH 5,0 или ниже
  • Не наносите более 18,9 пинт (2.4 галлона) Vydate C-LV на акр за сезон и не применяйте в течение 7 дней после сбора урожая.
• Комбинация предпосевной фумигации почвы и обработки нематицидом может использоваться для больших популяций M. chitwoodi, расположенных глубоко в почве.
  • Telone II от 9 до 18 галлонов / А плюс Mocap 15 G От 40 до 80 фунтов / А с внесением внесения и заделки на глубину от 4 до 6 дюймов путем центробежного вращения или дискового измельчения непосредственно перед посадкой. 5-дневный повторный вход. Пестициды ограниченного использования.
  • Telone II плотностью от 9 до 18 галлонов / А, за которым следует метамнатрий плотностью 40 галлонов / А, наносимый спринклерной или широковещательной системой и вводимый на глубину от 4 до 6 дюймов.Повторный вход через 5 дней после применения Telone II и повторный вход через 48 часов после применения метамнатрия. Пестициды ограниченного использования. Применяемый таким образом метамнатрий также контролирует рано умирающее заболевание (вертициллезное увядание).

Биологический контроль

• MeloCon WG для подавления нематод. См. Этикетку для конкретных типов приложений и времени. 4-х часовой повторный вход. O

Ссылка Ingham, R.E., Dick, R., and Sattell, R. 1999. Борьба с узловатыми нематодами Columbia на картофеле с использованием севооборотов и покровных культур.Публикация службы распространения знаний Университета штата Орегон EM 8740. 8 стр.

нематод, поражающих картофель, и устойчивые методы борьбы с ними

2. Основные виды нематод, поражающие картофель

2.1. Картофельные цистные нематоды (

Globodera spp.)

Картофельные цистные нематоды (PCN) — золотая нематода G. rostochiensis и бледная нематода G. pallida , являются двумя основными видами нематод, ограничивающими урожайность, которые поражают картофель в несколько субтропических регионов, где возделывается эта культура.В пределах родов Globodera насчитывается около 15 второстепенных видов [11], которые таксономически расположены рядом с родом Heterodera . Они принадлежат к отряду Rhabditida, подотрясу Tylenchina и семейству Heteroderidae, и из-за сходных морфологических характеристик Globodera spp. первоначально был отнесен к роду Heterodera [12].

Зрелые самки PCN, Globodera spp., Образуют цисты, которые представляют собой мертвые самки, которые становятся темнее и откладывают яйца внутри своего тела, когда условия не подходят для их выживания [11].У вида G. rostochiensis цисты меняют цвет с белого на желтые, а затем становятся коричневатыми, тогда как у G. pallida цисты не желтеют, а непосредственно меняют цвет с белого на коричневатый [11]. Эта стадия покоя яиц внутри цист может длиться до 20 лет, даже в отсутствие хозяина или других неблагоприятных условий окружающей среды [12]. Из-за этих неидеальных условий гибель яиц, находящихся внутри кисты, происходит постепенно. Годовая смертность колеблется от 50% для регионов с умеренным климатом и более 75% в регионах с более теплым климатом [13].Эта более высокая смертность яиц в более теплом климате происходит из-за Globodera spp. лучше приспособлен к субтропическим регионам, и его цикл прерывается при температуре выше 28 ° C [12]. Вид G. pallida лучше всего развивается при температуре от 10 до 18 ° C, а вид G. rostochiensis лучше приспособлен к более высоким температурам от 15 до 25 ° C [14].

Нематоды, Globodera spp., Распространены по всему миру и присутствуют на всех континентах. В Океании вид встречается в таких странах, как Австралия и Новая Зеландия.В Азии этот вид можно найти на Филиппинах, в Индии, Израиле, Японии, Ливане, Малайзии, Омане, Пакистане, Шри-Ланке и Турции. Этот вид более распространен в Европе, встречается в большинстве стран, таких как Австрия, Бельгия, Хорватия, Дания, Финляндия, Франция, Германия, Греция, Ирландия, Италия, Нидерланды, Норвегия, Польша, Португалия, Швеция, Швейцария и Великобритания. Они присутствуют в Алжире, Египте, Ливии, Марокко и Южной Африке, а также в Северной Америке, например. Канада, США и Мексика ( G.rostochiensis ). В Центральной Америке они были обнаружены в Сальвадоре ( G. rostochiensis ), Коста-Рике, Гватемале и Панаме ( G. pallida ), а в Южной Америке — в Аргентине ( G. pallida ). ), Боливии, Чили, Колумбии ( G. pallida ) и Эквадора ( G. pallida ) [15]. В Бразилии нематоды картофельных цист не обнаружены и считаются карантинным вредителем A1 [16].

Распространение ПХН в полевых условиях происходит несколькими способами, включая поливную воду, ливневые стоки, зараженные частицы почвы, зараженные коммерческие клубни семенного картофеля, зараженную упаковку клубней семенного картофеля, обувь, копыта животных, а также с помощью зараженного инвентаря и оборудования, в том числе другие [17, 18].

Диапазон хозяев PCN включает картофель, томат ( S. lycopersicum ), африканский баклажан ( S. aethiopicum ), баклажан ( S. melongena ) и другие пасленовые растения, включая Physalis spp., Datura spp., Hyoscyamus spp., Physoclaina spp., Salpiglossis spp. и Saracha spp. [15]. Такие виды, как D. ferox , Nicotiana acuminata , S. ligustrinum и S.pinnatum также являются хозяевами G. rostochiensis патотипа Ro1 в Чили [19].

ПХН считаются основным вредным организмом для производства картофеля, при котором потери урожая могут варьироваться от незначительных потерь до 70% или до полной потери [20]. Однако уровень повреждений и потерь зависит от сочетания факторов, включая рост популяции нематод, количество поколений в год, продолжительность вегетационного периода картофеля, температуру почвы и факторы хозяина [20, 21]. Кроме того, из-за неспецифических симптомов у картофеля, особенно надземного, потери часто не принимаются во внимание или объясняются неблагоприятными факторами, такими как другие патогены, недостаточное питание растений и недостаток влаги в почве [18].Типичные симптомы заражения нематодами проявляются на участках с плохим ростом в поле, изменяя генетические характеристики культуры, вызывая более мелкие, скрученные и аномально окрашенные листья, склонные к появлению коричневых пятен на полях и уменьшению количества и размеров листочков. которые в целом влияют на фотосинтез [6].

Растения картофеля, инфицированные Globodera spp. проявляются желтоватые симптомы, похожие на недостаток воды и питательных веществ, уменьшенный размер и количество клубней, с небольшими поражениями, что делает их нерентабельными.Растения с поврежденными корнями вянут, особенно при более высоких температурах в течение дня, и могут оставаться увядшими даже при поливе. Корневая система становится менее развитой, и растения производят большее количество боковых корней, что приводит к общему снижению роста растений, преждевременной гибели и не реагирует должным образом на внесение удобрений [14, 22].

Globodera spp. являются карантинными вредителями A1 в Бразилии и некоторых других странах. Из-за трудностей искоренения этой нематоды после того, как они были интродуцированы на картофельные поля, принимаются профилактические меры по предотвращению их интродукции, включая отказ от импорта картофеля из стран, в которых зарегистрированы нематоды, независимо от того, предназначен ли картофель для потребления или для посадки. некоторые правила, позволяющие избежать распространения нематод [23].

После регистрации нематод на картофельных полях следует использовать другие меры управления, чтобы избежать их распространения или снизить уровень их популяции и, таким образом, повысить урожайность. Успех в снижении уровня их популяции варьируется и зависит, среди прочего, от начальной плотности популяции, типа почвы и генотипа растений. Как правило, картофель с длинным циклом посадки осенью и сбор урожая весной имеет более выраженные потери урожая, чем сорта с коротким циклом [21].

Методы борьбы с ПХН включают использование карантинных правил, севооборот и сукцессию [15, 21], а также использование устойчивых сортов и нематицидов.Например, севооборот с ячменем показал сокращение G. rostochiensis до 87% [15]. Севооборот с основными хозяевами нематод, например также следует избегать картофеля, томатов, баклажанов или других пасленовых растений.

Использование устойчивых сортов против нематодной инфекции — один из наиболее эффективных и экологически безопасных методов борьбы с их заражением. Устойчивые сорта против Globodera spp. успешно использовались с уровнем контроля до 95% [19].Кроме того, во всем мире существует несколько селекционных программ, направленных на поиск генов устойчивости к этим нематодам [19].

Растения-ловушки также можно использовать для борьбы с этими нематодами. Эти растения будут вызывать вылупление яиц нематод с последующим предотвращением завершения цикла за счет уничтожения хозяина. Продолжительность времени имеет решающее значение, и растения должны быть уничтожены в надлежащее время после посадки, чтобы остановить цикл нематод [24]. Если растения не уничтожить или появиться слишком поздно, популяция нематод будет расти.Некоторые примеры использования растений-ловушек включают виды растений S. sisymbriifolium (Lam.), Для которых было показано значительное снижение плотности популяции PCN в поле до 80% [25]. Другие включают S. tuberosum, S. nigrum , S. dulcamara и D. stramonium , которые также показали многообещающие результаты [20].

В качестве альтернативы для борьбы с этими нематодами можно использовать растения-антагонисты. Растения-антагонисты первоначально будут переносить заражение нематодами; однако на более поздних этапах своего цикла растительные факторы прекращают свое дальнейшее развитие.Следующие виды растений: Crotalaria Spectabilis , C. juncea , Tagetes patula , T. minuta , T. erecta и Estizolobium spp. используются для решения проблем с корневыми нематодами на картофельных полях в Бразилии [23] и могут быть использованы для борьбы с Globodera spp. также.

Другие методы борьбы включают соляризацию почвы, особенно в регионах с более высокими температурами. Химический контроль с помощью нематицидов также используется в нескольких регионах с удовлетворительной степенью контроля.Такие продукты, как карбаматы, алдикарб и карбофуран, были успешно использованы. Однако соляризация почвы и использование нематоцидов обходятся дорого, а нематоциды могут вызывать побочные эффекты для человека и окружающей среды [21].

2.2. Узловые нематоды (

Meloidogyne spp.)

Узловые нематоды (RKNs), Meloidogyne spp., Являются наиболее агрессивной, опасной и экономически важной группой нематод, паразитирующих на растениях, оказывая значительное влияние на основные сельскохозяйственные культуры во всем мире [9, 26 ].В настоящее время описано более 90 видов [26], из которых M. javanica , M. incognita , M. arenaria и M. hapla составляют до 95% РКН в культурных почвах, некоторые из них имеют несколько рас, паразитирующих более чем на 2000 восприимчивых видов растений [27], и в целом представляют реальную угрозу для сельского хозяйства во всем мире [26, 28].

Эта группа нематод очень разнообразна, в основном из-за их вариаций цитогенетики (состояния анеуплоидии и полиплоидии), типов размножения (от амфимиксиса до партеногенеза), сложного типа паразитизма (расширенные взаимодействия со своими хозяевами), межвидовой гибридизации, криптических видов и широкий круг хозяев [27, 29, 30, 31, 32].

Нематоды с узловатыми корнями представляют собой эндоседентарные паразитические нематоды. Ювенильная стадия второй стадии (J2) — инфекционная стадия. После вылупления RKN из яиц, J2 мигрирует через почву к подходящему корню и использует специальные ферменты и стилеты для принудительного проникновения в сосудистый цилиндр, где RKN устанавливает свое место питания, вызывая гипертрофию и гиперплазию группы клеток, что приводит к набуханию и образованию гигантских клеток. На этом участке нематода проходит еще три шелушения (линьки), превращаясь в набухшую молодую самку.Зрелые самки начинают откладывать яйца в корень, образуя массу яиц, завернутых в студенистую матрицу. В каждой яичной массе в среднем 400–500 яиц, и она образуется в корковой паренхиме или на поверхности корней. Эмбриональное развитие нематоды приводит к первой стадии (J1), проходящей через шелушение (линьку) в яйце, за которой следует вторая стадия (J2). Взрослые самцы зараженными растениями не питаются; они покидают корни и свободно перемещаются в почве, пока не погибнут [4, 27].

Симптомы в полевых условиях включают пожелтение, задержку роста, увядание, появление коричневых пятен и гниение клубней. RKN вызывают гипертрофию и гиперплазию инфицированных клеток, что приводит к набуханию тканей, обычно известных как галлы. На пораженных клубнях также образуются галлы, известные как «попкорн», что в целом приводит к низкому качеству клубней (рис. 1) [5, 33]. Количество и размер галлов варьируются в зависимости от восприимчивости сортов, плотности популяции и благоприятных температур [26]. Корни, инфицированные RKN, изменяют потребление питательных веществ и воды, что приводит к выраженному ухудшению роста и качества клубней и снижению урожайности.Обычно в геноме Meloidogyne наблюдаются высокие уровни внутривидовых вариаций, и эта вариабельность может играть важную роль в изменениях морфологии и цитогенетики и, в конечном итоге, их способности воспроизводиться в определенных хозяевах [27].

Рис. 1.

Симптомы, вызванные нематодами, и характеристики нематод. (A) Клубень картофеля с симптомами заедания (набухания) RKN, (B) молодые особи RKN второй стадии (J2) внутри тканей корня, (C, D) сканирующие электронные микрофотографии, показывающие обзор губной области RKN и (E) самок RKN и их яичная масса, выступающая из растительной ткани.Любезно предоставлено (A) Израэлем Мединой (Университет Нак. Дель Альтиплано Пуно, Перу), (B, E) Джонатаном Изенбаком (Технологический институт Вигинии, США) и (C, D) Региной Карнейро (Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Бразилия).

Часто вторжение в корневую систему картофеля не вызывает повреждений, но как только клубни начинают зарождаться, клубни заражаются инфекционной ювенильной стадией второй стадии (J2), и происходит быстрое развитие и распространение. Таким образом, если корни и клубни картофеля заразятся на ранней стадии, несколько поколений патогена произойдут до сбора урожая, что обычно составляет примерно 110 дней после посадки [34].Однако это зависит от каждого сорта и систем управления. Выращивание картофеля в более теплых регионах или на песчаных почвах с ирригационной системой приведет к сочетанию благоприятных температур, структуры почвы и состояния влажности, что может привести к значительному увеличению серьезности инфекций РКН [34].

Убытки от заражения РКН в крайних случаях могут достигать 100% на картофельных полях. Также переменные потери происходят в результате сезона посадки и уровня заражения почвы [33].

RKN-виды все чаще встречаются в связи с посевами картофеля в тропиках и субтропиках, вызывая значительные экономические последствия из-за потерь урожая, в основном зависящих от сортов, благоприятного климата и плотности нематод, присутствующих во время посадки [5, 8, 9, 27, 35, 36]. Сообщается, что несколько видов RKN представляют собой все большую проблему для выращивания картофеля в нескольких регионах мира, и наиболее важными из них являются M. chitwoodi (Golden), M. fallax (Karssen), M.incognita (Кофоид и Уайт), M. javanica (Treub), M. arenaria (Neal) и M. hapla (Chitwood) [5, 35, 36, 37].

В регионах с умеренным климатом, то есть в Северной Америке, Европе и Австралии, M. chitwoodi является широко распространенным и наиболее важным видом RKN, влияющим на картофель, у которого были зарегистрированы серьезные повреждения, низкое качество клубней и экономические потери [34]. Этот вид РКН переносит гораздо более низкие температуры, чем M. incognita и M.javanica и, как сообщается, вызывает повреждение клубней при температуре ниже 6 ° C [34]. Кроме того, утвержденные нормы для некоторых нематицидов в США для борьбы с M. chitwoodi выше, чем для других Meloidogyne spp. Таким образом, любое распространение этой нематоды еще больше усложнит борьбу с ней. Meloidogyne fallax также признан серьезным вредителем картофеля в Европе, Новой Зеландии и Австралии, где он также является холодостойким видом [34]. Meloidogyne acronea (Coetzee), как сообщается, также инфицирует картофель, но редко встречается в коммерческих посевах, и о его распространении известно мало [34].

При обследовании видов RKN на картофельных полях на юге Бразилии [3] было обнаружено, что M. javanica было наиболее распространенным видом (90%), за которым следовали M. incognita (6,4%), M. arenaria (4,3%) и M. ethiopica (2,1%). Авторы также обнаружили, что изолятов M. javanica показали различия в агрессивности по отношению к двум протестированным восприимчивым сортам картофеля, что является важной информацией для скрининга многообещающих потомков с целью создания устойчивых материалов.

В аналогичном обзоре [36] с использованием подходов к секвенированию нескольких локусов, таких как межгенная область (IGS), сегменты расширения D2-D3 в 28S рДНК и гена субъединицы II цитохромоксидазы (COII) митохондриальной ДНК, было обнаружено, что сообщили о нескольких видах Meloidogyne , паразитирующих на картофеле в Южной Африке, включая M. javanica (23%), M. incognita (23%), M. arenaria (17%), M. enterolobii (14 %), M. chitwoodi (3%), M.hapla (1%) и неидентифицированный Meloidogyne spp. (19%). Таким образом, эти исследования показывают тенденцию к увеличению проблем, связанных с заражением картофельных полей РКН в связи с изменением климата и выращиванием сортов картофеля, подходящих для посадки в более теплых регионах мира. Степень потерь урожая картофеля, связанных с РКН, требует более точной количественной оценки.

Самый эффективный, недорогой, экологически и безопасный способ борьбы с RKN — это использование устойчивых сортов, которые обладают хорошими показателями урожайности и были протестированы в конкретном регионе, где выращивается картофель.Однако в настоящее время не существует сорта картофеля, устойчивого к Meloidogyne spp., Хотя есть исследования, сообщающие об идентификации генов устойчивости в генотипах дикого картофеля и задней интрогрессии в селекционные линии [38, 39].

Наиболее хорошо охарактеризованным геном устойчивости к RKN у дикого картофеля ( Solanum sect. Petota , solanaceae) является R Mc1 (blb) из S. bulbocastanum , ген, который эффективен против некоторых рас M .chitwoodi [38]. Механизм устойчивости R Mc1 (blb) основан на реакции гиперчувствительности и включает передачу сигналов кальция [40]. Недавние исследования показали, что устойчивость M. chitwoodi у разных видов Solanum основана на одном и том же гене, что ограничивает разнообразие доступных генов устойчивости [41]. Устойчивость к M. incognita , M. javanica и M. arenaria также была обнаружена у видов дикого картофеля S.sparsipilum и используются в качестве селекционных линий для создания устойчивых сортов картофеля (Международный центр картофеля — CIP).

В качестве альтернативы, химические нематициды использовались для борьбы с RKN у картофеля, особенно на больших посевных площадях [6]. Другие методы контроля включают севооборот или сукцессию с нехозяевами и бедными хозяевами, хотя их следует использовать осторожно, поскольку RKN имеет очень широкий диапазон хозяев и может принимать другие виды, не относящиеся к RKN, то есть Pratylenchus spp.и будет еще одной проблемой [42]. Чтобы севооборот был эффективным, он должен длиться не менее 4 лет вместе с эффективной борьбой с сорняками. Из-за этого требования севооборот может быть экономически не лучшим способом борьбы с этими нематодами для определенных систем и регионов земледелия. Некоторые сорта овса ( Avena sativa ), хлопок ( Gossypium hirsutum ) и травы, проявляющие устойчивость к RKN, можно использовать в чередовании с картофелем, чтобы минимизировать ущерб. Другие схемы севооборота, применявшиеся для M.javanica включают использование сорго, кукурузы и клещевины, устойчивых к этому виду. В целом, культуры капусты, включая капусту, цветную капусту, горчицу и пекинскую капусту, используются для чередования нематод RKN [42]. Другие рекомендуемые методы управления включают регулярное и своевременное культивирование и сушку почвы, немедленное уничтожение добровольных растений и клубней картофеля, посадку сертифицированных клубней картофеля, выбор сроков посадки, чтобы избежать высокой популяции RKN во время роста клубней, сокращение цикла картофеля за счет использования скороспелых сортов. и, наконец, непосредственно перед посадкой, при посадке и после посадки рациональное использование зарегистрированных нематоцидов [34].

2.3. Нематода ложного корневого узла (

Nacobbus aberrans )

Нематода ложного корневого узла Nacobbus aberrans (Thorne & Allen) (Nematoda, Pratylenchidae) — нематода, паразитирующая на растениях, встречающаяся в основном в некоторых регионах Севера (Мексика и Мексика). США) и Южной Америки (Аргентина, Перу, Эквадор, Чили и Боливия) [43, 44, 45]. В США N. aberrans паразитирует на сахарной свекле и других овощных культурах, но не заражает картофель, тогда как в Мексике и некоторых странах Южной Америки этот вид нематод представляет собой серьезную проблему на картофельных полях [43, 45].

Этот вид является карантинным вредным организмом в нескольких регионах и считается серьезным вредителем картофеля, при котором, согласно сообщениям, потери урожая достигают 55–90% [43, 44, 45]. Этот вид нематод обнаружен в теплицах Англии, Нидерландов, Финляндии, России, Индии и Китая [43, 45]; однако он не был обнаружен ни в одном другом регионе за пределами Северной и Южной Америки [43] и, возможно, был ликвидирован после его обнаружения в странах Европы и Азии. В Андском регионе Перу и Боливии, например, N.aberrans , наряду с нематодами картофельных цист, G. rostochiensis и G. pallida и RKN Meloidogyne spp. считаются основными видами нематод, существенно влияющими на производство картофеля, когда обычно сообщается о сильно зараженных почвах [43, 44].

Картофель является наиболее значительным хозяином N. aberrans ; однако он имеет широкий круг хозяев и паразитирует на нескольких других экономически важных видах растений. К этим видам относятся пасленовые растения, т.е.е. Solanum и Capsicum ; морковь, салат, капуста, горох, сахарная свекла, огурцы, Opuntia spp., Cactaceae, Poaceae, а также некоторые сорняки [43, 44].

Симптомы инфекции N. aberrans у картофеля аналогичны симптомам, вызываемым Meloidogyne spp., Включая образование более дискретных и округлых галлов, тогда как галлы из RKN имеют удлиненную форму, образующую вздутие вдоль корней. Пораженные корни картофеля также негативно влияют на формирование клубней [43, 44, 45].

Жизненный цикл N. aberrans аналогичен таковому у видов RKN. Молодь второй стадии (J2) вылупляется из яиц, мигрирует через почву к подходящим корням и использует свой стилет и ферменты для проникновения. Они проникают в сосудистую систему и модифицируют группу клеток, что приводит к развитию галлов. В отличие от видов RKN, третья, четвертая стадия и неполовозрелые самки N. aberrans являются мигрирующими. Яйца производятся в студенистой матрице, которая выступает из кортикальной ткани.Нематода может формировать 2–3 поколения за сезон урожая в зависимости от идеальной температуры, которая колеблется от 14 до 25 ° C [43, 44].

Методы борьбы с N. aberrans включают использование нематоцидов, севооборот (4–6 лет), биологический контроль с грибами-антагонистами и бактериями, использование устойчивых или толерантных сортов картофеля и правила карантина для регионов, свободных от этой нематоды. виды [43, 44].

2.4. Нематоды, поражающие корни (

Pratylenchus spp.)

Нематоды, пораженные корнями Pratylenchus spp. являются важными паразитами растений в тропиках и субтропиках [46]. Они имеют широкий круг хозяев и широко распространены в тропических и субтропических регионах, особенно в Бразилии, на юге США и в Африке [46, 47]. Сообщалось, что по крайней мере 15 видов паразитируют на картофеле во всем мире, в том числе P. andinus , P. brachyurus , P. coffeae , P. crenatus , P. minyus , P.Penetrans , P. scribneri, P. thornei , P. vulnus , P. neglectus и P. zeae [35, 48]. В Бразилии было зарегистрировано не менее 10 видов на нескольких культурах, из которых P. brachyurus , P. coffeae , P. zeae и P. Penetrans считаются наиболее часто встречающимися у картофеля [46] , с преобладанием P. brachyurus на большинстве картофельных полей по всей стране [6, 46]. Pratylenchus Penetrans считается наиболее важным видом из Pratylenchus spp.для картофельных полей, особенно в Канаде и других странах Северной Америки, где были зарегистрированы значительные потери урожая [49].

Вид Pratylenchus обычно называют нематодами, поражающими корни, из-за типичных симптомов некроза, которые они вызывают в корнях. Этот вид считается мигрирующей эндопаразитарной нематодой, обычно обнаруживаемой в корнях, а также между корнями и частицами почвы [46]. Pratylenchus вида меньше 1 мм в длину.Самцы и самки похожи на червей, различаются только половыми признаками. Самки имеют один яичник (моновариальный) и размножаются путем полового размножения, называемого амфимиксисом, или путем митотического и мейотического партеногенеза. Их легко распознать по склеротизированной губной области и перекрывающимся вентрально пищеводным железам и, как правило, по темному содержимому кишечника. Стилет хорошо развит, с широкими базальными луковицами. Большинство видов являются многоядными, демонстрируя способность паразитировать на культурных растениях — многолетних, полупроводниковых, однолетних, а также на сорняках [46].

Pratylenchus spp. различных стадий жизни проникают в субэпидермальные слои клубней картофеля и проходят через кору, где они питаются клетками паренхимы и вызывают поражения, которые становятся темными пятнами на клубнях. Они непрерывно мигрируют в тканях, внутри и между клетками, вызывая такие поражения. В зависимости от благоприятных температурных и почвенных условий они могут иметь до 3-х поколений в течение картофельного цикла и могут достигать 10 000 особей на 10 г образцов картофеля [46].Кроме того, эти поражения корня и клубней способствуют вторжению вторичной инфекции бактериальными и грибковыми патогенами, что приводит к дальнейшему некрозу клубней [46, 50]. Зараженные клубни могут гнить и иметь более короткий срок хранения по сравнению со здоровыми клубнями. На поле инфицированные растения картофеля плохо растут, о чем свидетельствуют разбросанные участки низкорослых растений, позднее цветение и интенсивный некроз корней [46]. В целом инфицирование Pratylenchus spp. выращивание картофеля может снизить урожайность до 50% в некоторых зарегистрированных случаях, в зависимости от нескольких факторов, таких как уровень популяции, температура, почвенные условия и сорта картофеля [46, 50].

Методы управления Pratylenchus spp. включают успешную интеграцию севооборота и сукцессии сельскохозяйственных культур, использование устойчивых сортов и генотипов, надлежащее физическое и химическое управление почвой и устранение сорняков во время уборки урожая и в межсезонье. Следует избегать посадки картофеля во время высоких температур и сильных дождей [42].

Все Pratylenchus ssp. имеют широкий спектр хозяев, который также включает несколько культурных культур и сорняков.Последовательный посев сои, картофеля, пастбищ и кукурузы способствует увеличению популяции нематод [6]. Авторы [51] оценили влияние севооборота и методов управления почвой, таких как сокращение посевов, покровных культур и внесение органических удобрений, на плотности популяции P. neglectus картофеля в песчаной почве на юге Альберты, Канада. Чередование культур от 3 до 6 лет включало картофель, сушеные бобы, пшеницу, сахарную свеклу и овес. Практика сохранения включала осенние покровные культуры и заделку компоста вместо неорганических удобрений. Pratylenchus neglectus популяции были затронуты длиной севооборота, но не методами землепользования. Плотность населения при 3-летнем севообороте была выше, а урожайность картофеля в обычном 3-летнем севообороте была стабильно ниже, чем при более длительных периодах севооборота.

Некоторые другие виды растений, такие как Crotalaria и Tagetes , являются отличными вариантами для севооборота / сукцессии с картофелем. Авторы [52] провели исследование по мониторингу поражений корней нематодами, в основном P.Penetrans на двух бархатцах ( Tagetes tenuifolia сорт Nemakill и сорт Nemanon), райграс однолетний ( Lolium multiflorum сорт Lemtal), клевер красный ( Trifolium pratense cv. Florex ) и соя G39ly cv. . Proteus) и картофель (сорт Superior) для трех последующих посадок. Уровни популяции нематод были стабильно ниже — Tagetes spp. по сравнению с другими протестированными покровными культурами. В результате средняя урожайность картофеля была значительно выше (8–14%) при посеве картофеля после Tagetes spp.Красный клевер и соя позволили получить наибольшее накопление нематод, а средний урожай картофеля был ниже, чем у других протестированных покровных культур.

Отсутствие севооборота или сукцессии с культурами, которые являются хорошими хозяевами, такими как соя, фасоль, кукуруза, сорго и некоторые кормовые травы, система нулевой обработки почвы; использование песчаных и средних почв и плохое питание растений — вот некоторые из факторов, которые могут усилить проблемы, связанные с поражением корней картофеля нематодами. Благоприятные температура и влажность (около 20–25 ° C и влажность 60–80%) и избыток азотных удобрений также усугубляют проблемы, связанные с этими нематодами [42].

2,5. Нематода корневой гнили (

Ditylenchus destructor)

Род Ditylenchus (Nematoda, Tylenchida) занимает сложное систематическое положение и несколько раз переименовывался с несколькими синонимами [53]. В настоящее время существует 81 описанный вид в пределах родов, и D. angustus, D. dipsaci и D. destructor являются паразитирующими на растениях нематодами, имеющими экономическое значение, причем два последних вида являются важными патогенами картофеля, особенно когда они связаны с грибковые возбудители.Кроме того, эти нематоды занесены в список карантинных вредителей в нескольких странах.

Ditylenchus spp. были зарегистрированы в нескольких регионах мира, вызывая прямой и косвенный ущерб культивируемым культурам, и в целом имеют широкий спектр хозяев [48]. Виды D. destructor и D. dipsaci являются важными патогенами картофеля, особенно в умеренном климате. Ditylenchus destructor является основным патогеном картофеля в таких регионах, как Европа, особенно Россия, Азия, Северная Америка, Океания и некоторые изолированные регионы Южной Америки и Южной Африки [48].

Симптомы, вызываемые D. destructor , обычно не наблюдаются на поверхности пораженного растения. Сильно инфицированные клубни приводят к появлению поврежденного растения из-за физиологических и морфологических нарушений, вызванных инфекцией нематод, что в конечном итоге может привести к гибели растения. Раннее заражение можно обнаружить, сняв клубень, и при этом могут появиться небольшие беловатые пятна [48].

Ditylenchus dipsaci , также известный как стеблевая и луковичная нематода, чаще встречается в чесноке, но он также повреждает другие виды растений, включая картофель, и поражает стебли, столоны и клубни.На пораженных клубнях картофеля появляются поражения от серого до коричневатого цвета, при этом в целом растение плохо растет. Больные стебли становятся опухшими и искривленными. На листьях также могут образовываться галлы, вызывающие значительную деформацию листа [54].

Использование севооборота для борьбы с D. destructor и D. dipsaci нецелесообразно из-за их широкого диапазона хозяев. Использование устойчивых генотипов — наиболее эффективный, экономичный и экологически безопасный метод борьбы с нематодной инфекцией. В настоящее время имеется ограниченная информация о наличии устойчивых и толерантных сортов картофеля к этим нематодам.Авторы [55] оценили 25 сортов картофеля на устойчивость и толерантность к инфекции D. destructor и D. dipsaci , и на основе фактора воспроизводства нематод (RF) 16 сортов были оценены как восприимчивые (S), в то время как 5 других как устойчивые (R) к D. destructor ; Сорта картофеля «Новатор», «Авека» и «Спунта» также были признаны устойчивыми к D. dipsaci . В их исследовании сорт картофеля «Дезире» был признан очень чувствительным к обоим видам D.destructor и D. dipsaci .

Другие меры борьбы с этими нематодами включают использование свободных от нематод полей, свободных от нематод клубней семенного картофеля и, в конечном итоге, может быть рекомендовано использование химических нематод.

2.6. Короткокорневые нематоды (

Trichodorus и Paratrichodorus spp.)

Короткокорневые нематоды, Trichodorus и Paratrichodorus spp. (Trichodoridae), принадлежат к семейству Trichodoridae (Thorne).Нематоды этого семейства представляют собой группу важных паразитарных патогенов растений и включают около 100 описанных видов в пределах пяти родов [56]. Короткокорневые нематоды — это эктопаразиты, которые обычно собираются на кончиках корней и имеют длинный твердый и изогнутый стилет, называемый онхиостилем, который они используют для прокалывания растительных клеток во время питания, предпочтительно меристемных клеток кончиков корней. Ущерб, вызванный их прямым питанием, может быть значительным, с утолщением корня и атрофией, ранним старением и остановкой роста растений (задержкой роста), состоянием, известным как «толстый корень» [56].

Триходориды широко распространены по всему миру, хотя некоторые виды ограничены определенным регионом. Исследования распространения и экологии триходорид, а также механизмов, участвующих в передаче определенных вирусов, могут в конечном итоге привести к новым стратегиям борьбы с ними [56]. Trichodorus spp. встречаются в песчаных почвах в нескольких регионах мира. Хотя они более специализированы на однодольных, они также паразитируют на двудольных и считаются важной нематодой для картофеля в тропиках и субтропиках.Однако уровень повреждений в полевых условиях, их общее распределение и экономические потери, связанные с их заражением, изучены недостаточно [57].

Несмотря на то, что существует значительный объем данных, сообщающих о воздействии этих нематод как паразитов растений, их способность переносить определенные вирусы повысила их важность для сельского хозяйства, когда несколько видов Trichodoridae были идентифицированы как вирусные переносчики [56]. . Таким образом, они считаются экономически важными для выращивания картофеля как из-за их прямого повреждения, так и из-за передаваемых ими вирусов.Например, Trichodorus spp. обладают способностью распространять вирусы на сорта картофеля, особенно вирус табачной погремушки — TRV, вирус рода Tobravirus, вызывающий болезнь картофеля, известную как пятнистость пробкового кольца [6, 57]. Ювенильная и взрослая стадии Trichodorus spp. могут переносить эти вирусы после кормления больными растениями. Вирусы застревают в области стилета и не циркулируют внутри тела нематоды; однако нематоды могут оставаться с вирусом до 4 месяцев или до появления шелушения, при котором нематода теряет свою вирусную нагрузку [56].

TRV-инфицированные растения картофеля проявляют системные и местные симптомы, такие как некроз, хлороз и общая задержка роста. Пораженные клубни картофеля могут проявлять некротические поражения с хрупкими тканями, а коммерческие клубни картофеля низкого качества могут возникать даже при легких симптомах [58].

Другие симптомы, связанные с инфекцией TRV, включают задержку прорастания растений и последующий плохой рост, снижение веса клубней и урожайности картофеля, высокую распространенность плохих товарных клубней картофеля с низким содержанием сухого вещества и окисление клубней после варки [56].

В целом, методы борьбы с короткокорневыми нематодами включают методы, перечисленные и для других видов, то есть профилактика (использование сертифицированного посадочного материала, очистка почвы от машин и оборудования, предотвращение передвижения животных по зараженным полям), растениеводство. ротация, культурные практики и использование нематоцидов [6].

3. Использование иммуноцитохимии для цитологических образцов

Вы не должны отказываться от дополнительного окрашивания, даже если у вас под рукой один-единственный цитологический образец.Ресурсы для применения иммуноцитохимии к одному-единственному цитологическому образцу представлены ниже. В случае жидкостной цитологии (LBC) легко доступны дополнительные множественные образцы. В Японии, однако, процедура LBC все еще недостаточно развита из-за низкой стоимости. Следовательно, эти методы практически действительны и полезны [45].

3.1 Подготовка клеточного блока

Отложения жидких образцов, таких как плевральные и перикардиальные выпоты, асцит, содержимое кистозных поражений и моча, могут сохраняться в течение длительного периода времени в виде клеточных блоков после фиксации формалином и заливки парафином [46] .Метод иммуноокрашивания и in situ гибридизации (ISH) может быть выполнен путем приготовления нескольких парафиновых срезов из клеточного блока. К настоящему времени было сообщено о нескольких технических изобретениях, как приготовить блоки ячеек [47].

На рисунке 20 представлена ​​хроническая активная инфекция вируса Эпштейна-Барра (EBV), наблюдаемая у мужчины в возрасте 20 лет [48]. У пациента проявились признаки и симптомы коллагеновой болезни, такие как лихорадка, кожная сыпь, мышечная слабость, дисфункция печени и эозинофилия.В цитологическом препарате асцита было обнаружено несколько крупных зернистых лимфоцитов (форма атипичных лимфоцитов) на фоне эритроцитов, эозинофилов и гемофагоцитарных макрофагов. Был подготовлен клеточный блок, чтобы узнать природу лимфоидных клеток. Лимфоциты большого размера экспрессировали маркеры естественных клеток-киллеров, такие как CD45 и CD56, и с помощью метода ISH было продемонстрировано, что малая ядерная РНК, кодируемая EBV (EBER), находится в ядрах. Окончательный диагноз — хроническая активная ВЭБ-инфекция с вирус-ассоциированным гемофагоцитарным синдромом.Прогноз этого заболевания плохой. Фактически, через семь месяцев пациент умер от перфорации язвы двенадцатиперстной кишки. Следует отметить, что EBV не продуцирует вирусные частицы в инфицированной клетке, поэтому внутриядерные включения не образуются, и поэтому метод EBER необходим.

Рисунок 20.

Хроническая активная EBV-инфекция (цитология асцита, слева, Giemsa, левая вставка: усиленное изображение, справа: клеточный блок H&E, правая вставка: EBER). Геморрагический асцит содержит большие зернистые лимфоциты и эозинофилы.В цитоплазме крупных зернистых (атипичных) лимфоцитов отмечаются азурофильные гранулы. В препарате клеточных часов ядра атипичных лимфоцитов положительны по методу EBER-ISH. Внутриядерных включений не видно.

3.2 Метод повторного окрашивания

Метод повторного окрашивания применим к одиночному (одному и только) цитологическому образцу [49, 50]. Сначала клетки или области мишени следует пометить на обратной стороне предметного стекла алмазной ручкой, а затем сделать микрофотографию.После удаления покровного стекла в ксилоле окрашенные красители можно удалить путем погружения в раствор кислого спирта (50% этанол, содержащий 0,5% соляной кислоты) на несколько часов или просто погружая образцы в водопроводную воду на ночь. Иммуноокрашенные клетки или области-мишени повторно микрофотографируются для сравнения.

В случае предметных стекол, окрашенных по Гимзе, или иммуноокрашенных препаратов на предметных стеклах, покрытых триметокси [3- (фениламино) пропил] силаном, метод повторного окрашивания особенно ценен, поскольку метод переноса клеток, описанный ниже, неприменим из-за плотное прикрепление клеток.

На Фигуре 21, показывающей цитологию соскоба инфекции вируса простого герпеса (ВПГ) на вульве, метод повторного окрашивания позволяет визуализировать внутриядерные и внутрицитоплазматические вирусные антигены. Для иммуноокрашивания использовали коммерчески доступные поликлональные антитела. Инфекция ВПГ вульвы относится к заболеваниям, передающимся половым путем (ЗППП).

Рисунок 21.

Инфекция, вызванная вирусом простого герпеса (соскоб с вульвы, слева: Папаниколау, справа: иммуноокрашивание на ВПГ). При использовании метода повторного окрашивания вирусные антигены, иммуноокрашенные поликлональными антителами, локализуются как в галоидированных ядрах, так и в цитоплазме.

На рис. 22 показаны включения цитоплазмы хламидий, так называемые «небулярные тельца включения», в цитологическом исследовании соскоба из шейки матки. Хламидиоз также представляет собой ЗППП. Включения четко перекрашиваются моноклональным антителом B104.1 против Chlamydia trachomatis . Крошечные цитоплазматические включения, визуализируемые с помощью иммуноокрашивания, практически не распознаются в препарате, окрашенном по Папаниколау.

Рисунок 22.

Хламидийная инфекция (мазок из шейки матки, слева: Папаниколау, справа: иммуноокрашивание с помощью моноклональных антител).С помощью метода повторного окрашивания невулярные тельца включения в цитоплазме четко помечаются на хламидийный антиген. Крошечное включение в левой ячейке (острие стрелки) практически не распознается в мазке Папаниколау.

3.3 Техника переноса клеток

Если у вас есть одно-единственное предметное стекло с образцом цитологии, окрашенным по Папаниколау, или гистологическим образцом, окрашенным гематоксилином и эозином (H&E), и вы хотите оценить экспрессию иммуноцито / гистохимических маркеров, метод переноса клеток [51] весьма полезен и ценен (рис. 23).Во-первых, необходимо удалить покровные стекла, погрузив их в теплый ксилол. Во-вторых, образец покрывают монтажной средой / смолой толщиной 2–3 мм, чтобы образовать пленку покрытия из затвердевшей монтажной среды в теплом инкубаторе в течение ночи. Затем пленку затвердевшей смолы следует снять с предметного стекла, погрузив в теплую воду на один час, чтобы клетки или ткани переместились на сторону пленки. Пленку затвердевшей смолы помещают в воду на покрытое силаном предметное стекло и сушат в теплом инкубаторе.Наконец, компонент смолы может быть удален путем погружения в ксилол, чтобы клетки и ткани были перенесены на новое предметное стекло. Вы можете получить множество предметных стекол, если разрезать затвердевшую смолу ножницами на несколько частей.

Рисунок 23.

Метод переноса клеток. a и b: Клетки, окрашенные по Папаниколау, в мазке из шейки матки переносят на пленку затвердевшей смолы, и пленку разрезают на части, чтобы получить множество образцов, помещенных на стеклянные предметные стекла, покрытые силаном. c и d: Клетки, размазанные за пределами покровного стекла, можно перенести на другое предметное стекло без удаления покровного стекла.

Клетки, размазанные за пределами покровного стекла, можно перенести на другое предметное стекло, не удаляя покровное стекло (рис. 23). Это особенно полезно в случае гинекологических цитологических образцов.

При обычном методе передачи ячеек для передачи ячеек требуется время. Ито и др. [52] изобрели экономящий время метод переноса клеток за один час (таблица 4). Вкратце, монтажная среда должна быть разбавлена ​​ксилолом вдвое, а пленка армирования должна затвердеть на горячей плите при температуре 70–80 ° C.

Удаление покровного стекла Покровное стекло можно удалить, окунув его в теплый ксилол Нанесение монтажной среды Монтажной среды (например, Малинол Ⓡ , Muto Chemicals, Tokyo) следует в два раза разбавить ксилолом и нанести один мл разбавленной смолы на размазанные клетки на предметном стекле. Затвердевание Смола должна затвердеть в течение 30 минут на горячей плите при температуре 70–80 ° C. Размягчение Стеклянное предметное стекло с липкой пленкой смолы следует замочить на 15 минут в теплой воде при 50–60 ° C. Отсоединение Смягченную пленку смолы можно снять со стеклянного предметного стекла с помощью пинцета. Отслоившуюся пленку ножницами можно разделить на несколько частей. Склеивание Пленку смолы замачивают в воде и наклеивают на новое стекло, покрытое силаном.Осторожность нужна для распознавания правой стороны пленки. После удаления излишка воды предметное стекло с перенесенными клетками следует высушить на горячей плите при температуре 70–80 ° C. Вы можете приготовить множество предметных стекол, если разрезать полимерную пленку ножницами на несколько частей. Удаление затвердевшей смолы Затвердевшую смолу можно удалить погружением в ксилол. Затем гидратация достигается путем помещения предметного стекла в этанол. Препарат готов к иммуноокрашиванию.

Таблица 4.

Технология переноса ячеек Itoh, экономящая время.

Если количество клеток-мишеней в образце невелико, рекомендуется перед снятием покровного стекла пометить клетки алмазной ручкой на обратной стороне предметного стекла. Когда используется долго хранящийся в архиве и полностью высушенный образец, удалить покровное стекло нелегко. Для ускорения удаления раствор ксилола следует нагреть до 70–80 ° C и / или потрескать покровное стекло алмазной ручкой.

Harada et al. [53] сообщили, что отделение покровного стекла ускоряется при использовании упаковочной клейкой ленты, как показано в таблице 5. На рисунке 24 показан этап метода Харады для быстрого удаления покровного стекла. Метод применим к архивным стеклянным предметным стеклам, длительно хранимым при комнатной температуре в течение 20 лет. Удаление покровного стекла занимает всего один час. Комбинируя метод Харады с вышеупомянутым быстрым методом Ито для переноса клеток, старые предметные стекла для цитологии готовы к иммуноцитохимическому анализу в течение нескольких часов.

Приготовление теплого ксилола Стеклянный контейнер хранят в инкубаторе в тепле при 62–64 ° C. Подготовка упаковочной изоленты, обрезанной по размеру покровного стекла Упаковочная изолента должна быть обрезана по размеру покровного стекла, немного больше размера покровного стекла. Вымачивание предметного стекла в теплом ксилоле Стеклянное предметное стекло замачивают в теплом ксилоле на 40 минут. Удаление ксилола Теплый ксилол полностью удаляют с покровного стекла с помощью KimWipes® (Kimberly Clark Corp, Ирвинг, Техас, США). Наклейка упаковочной клейкой ленты Кусок упаковочной клейкой ленты равномерно приклеен к покровному стеклу. Убедитесь, что упаковочная клейкая лента равномерно приклеена (без пузырей), наблюдая с обратной стороны. Снятие покровного стекла Упаковочную клейкую ленту следует снимать вместе с покровным стеклом на одном дыхании, не задумываясь. Замачивание предметного стекла в ксилоле Затем предметное стекло замачивают в ксилоле при комнатной температуре, готовясь к следующему этапу.

Таблица 5.

Метод Харады для быстрого удаления покровного стекла.

Примечание: шаги 4–7 следует выполнять как можно быстрее.

Рис. 24.

Харада быстро снял покровное стекло с помощью упаковочной клейкой ленты (срез простаты, окрашенный гематоксилином и эозином, хранился при комнатной температуре в течение 20 лет).a: вытрите теплый ксилол с помощью KimWipes®, b: равномерно приклейте кусок упаковочной клейкой ленты, размер которого немного больше покровного стекла, c: убедитесь с обратной стороны, что лента была приклеена равномерно, без пузырьков, d: Снимите упаковочную клейкую ленту вместе с покровным стеклом на вдохе.

На рис. 25 показана идентификация генома вируса папилломы человека (ВПЧ) типа 16 в ядрах плоских клеток шейки матки с тяжелой дисплазией. Клетки в стандартном мазке из шейки матки переносили на покрытое силаном предметное стекло, и метод ISH применяли для локализации вирусного генома в ядрах диспластических клеток.Этап переноса клеток необходим, чтобы избежать отделения клеток на этапе окрашивания, поскольку предварительная обработка образца нагреванием неизбежна для метода ISH. Таким образом, окрашенная по Папаниколау цитоморфология и состояние инфекции ВПЧ могут быть напрямую сопоставлены в одних и тех же клетках шейки матки.

Рисунок 25.

Тяжелая дисплазия шейки матки (слева: Папаниколау, справа: ISH для ВПЧ, геном типа 16). Клетки переносили на покрытое силаном предметное стекло для локализации генома ВПЧ 16 типа методом ISH, требующим предварительной обработки нагреванием.Пунктирные сигналы видны в диспластических ядрах. Микроскопические характеристики клеток, инфицированных ВПЧ, можно напрямую сравнить с характеристиками окрашивания Пап.

Мазок из шейки матки был взят у женщины в постменопаузе, и у нас в руках было одно-единственное предметное стекло. Клетки на предметном стекле переносили на другое предметное стекло, покрытое силаном. Сгруппированные атипичные парабазальные кератиноциты на фоне старческого кольпита были положительно окрашены на p16-INK4a, что указывает на канцерогенную инфекцию ВПЧ (истинная дисплазия, инфицированная ВПЧ, или плоскоклеточное интраэпителиальное поражение) [45], как показано на рисунке 26.Таким образом, подлинная дисплазия, связанная с ВПЧ, отличалась от реактивной (доброкачественной) атипии парабазальных кератиноцитов, вторичной по отношению к старческой атрофии. Предварительная обработка нагреванием является важным этапом для иммунолокализации p16-INK4a, который является продуктом гена-супрессора опухоли для модуляции клеточного цикла. Канцерогенная инфекция HPV инактивирует ген ретинобластомы (RB), что приводит к сверхэкспрессии p16-INK4a. Другими словами, p16-INK4a является маркером инфицированных ВПЧ клеток шейки матки [54].

Рисунок 26.

Умеренная дисплазия шейки матки после менопаузы (слева: Папаниколау, справа: Иммуноокрашивание на p16-INK4a). Следует различать диспластические изменения и реактивную атипию на фоне старческого кольпита. Экспрессия p16-INK4a подтвердила предраковое состояние шейки матки у этой пациентки в постменопаузе. После переноса клеток на предметное стекло, покрытое силаном, p16-INK4a иммуноокрашивали с использованием индуцированного нагреванием извлечения антигена.

Следует отметить, что метод клеточного переноса применим к парафиновым срезам, а также к цитологическим образцам, окрашенным по Папаниколау, в гинекологической и респираторной областях, но окрашенным по Гимзе цитологическим препаратам, использующим сухую фиксацию, и цитологическим образцам жидкой формы, размазанным по силану. предметные стекла с покрытием не подходят для техники переноса клеток.

Технику переноса клеток можно применять для переноса когезионных клеток, культивированных на пластиковом предметном стекле (камера Nunc Lab-Tek®), на предметное стекло, покрытое силаном. Ксилол неприменим к пластиковому предметному стеклу, и покровное стекло не может быть помещено на пластиковое предметное стекло. Предметные стекла разбитого стекла можно отремонтировать, используя технику переноса клеток (рис. 27) [55].

Рис. 27.

Ремонт разбитого предметного стекла методом переноса клеток. a: предметное стекло разбито, b: сломанное предметное стекло поддерживается другим предметным стеклом, снизу приклеенным эпоксидным клеем, c: покровное стекло удаляется в теплом ксилоле, d: на предметное стекло наносится монтажная среда (смола), e : Пленка затвердевшей смолы отслаивается после погружения в теплую воду. F: пленка смолы наклеивается на новое предметное стекло.После достаточного высыхания смолу удаляют в ксилоле и затем застывают покровное стекло.

3.4 Применение цитологических образцов для ультраструктурного исследования и анализа полимеразной цепной реакции

Цитологические образцы, фиксированные этанолом, могут применяться для электронно-микроскопических и иммуноэлектронных микроскопических исследований. Тонкие структуры вирусных частиц и хламидийных тел сохраняются даже после фиксации этанолом. Фиг. 28 демонстрирует иммуноэлектронное микроскопическое исследование хламидийного антигена в столбчатой ​​клетке шейки матки.В тельце небулярного включения в фиксированной этанолом клетке отчетливо наблюдаются как элементарные тельца, так и сетчатые тельца хламидийного микроба. Плазматическая мембрана частиц положительно помечена моноклональным антителом [56]. Фиг.29 схематически иллюстрирует клеточный цикл C. trachomatis в инфицированной клетке. Элементарные тела меньшего размера представляют собой инфекционные частицы, тогда как сетчатые тела большего размера относятся к пролиферативной форме. Методика ISH также может быть применена к цитологическим препаратам [57].

Рис. 28.

Иммуноэлектронное микроскопическое исследование хламидийного антигена с использованием мазка из шейки матки, фиксированного этанолом. a: Папаниколау, b: Иммуноокрашивание на антиген Chlamydia trachomatis, c и d: Иммуноэлектронная микроскопия с использованием метода предварительного внедрения, c: Низкое увеличение, d: Высокое увеличение, E: Элементарное тело, R: Сетчатое тело, столбцы = 1 мкм (c) и 0,2 мкм (г). Хламидийный антиген локализуется на мембране частицы. Сетчатые тела крупнее элементарных. Прекрасная морфология довольно хорошо сохраняется даже после фиксации этанолом.

Рисунок 29.

Схематическое изображение цикла роста Chlamydia trachomatis. Элементарные тельца меньшего размера (красные) инфицируют клетку, а сетчатые тельца большего размера (зеленые) пролиферируют с образованием интрацитоплазматических невулярных включений. Промежуточные тела (желтые) указывают на переходную форму между сетчатыми и элементарными телами. N = ядро.

Патогены часто локализуются в ограниченной части образца. Для нас практично и удобно сфокусировать мишень на инфицированной клетке для (иммуно) электронного микроскопического исследования.Вначале иммуноокрашивание диаминобензидиновой цветной реакцией следует проводить на световом микроскопическом уровне. После получения микрофотографий покровное стекло удаляют, образец повторно фиксируют в 1% растворе четырехокиси осмия, и клетки подвергают приготовлению блоков из эпоксидной смолы (Epon) с использованием метода капсулы с перевернутым пучком. Фиксация этанолом ускоряет проникновение молекул антител в клетку, поэтому стандартный метод световой микроскопии дает отличный результат также на ультраструктурном уровне.Прекрасная морфология микробов в виде частиц хорошо сохраняется даже после фиксации этанолом.

Цитологический образец может быть проанализирован методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием метода клеточного переноса. Пленку затвердевшей смолы, полученную из мазка, окрашенного по Папаниколау, следует разрезать ножницами. Части образца хранятся в виде слайдов, окрашенных по Папаниколау, в то время как ДНК или РНК могут быть извлечены из других частей после обработки ксилолом [45].

Фигура 30 иллюстрирует колонизацию Entamoeba gingivalis в воспаленном экссудате, наблюдаемую вокруг внутриматочного противозачаточного устройства (ВМС).Микроскопически амебные трофозоиты разбросаны вокруг зерен актиномикоза [58]. Пациентка в возрасте 50 лет обратилась с жалобами на флюор гениталий белого цвета. После удаления ВМС были взяты цитологические препараты с поверхности устройства. Женщина в постменопаузе полностью забыла об искусственном материале, вставленном в ее матку. Для подтверждения диагноза был проведен ПЦР-анализ с использованием метода клеточного переноса. Последовательность ДНК E. gingivalis была идентифицирована по полосе на основе 221 на геле.Было очевидно, что оральный секс вызвал инфекцию анаэробных жителей ротовой полости (как Actinomyces , так и E. gingivalis ) [59] вокруг искусственного материала. Рост Actinomyces , облигатного анаэробного микроба, обеспечил выживание облигатных анаэробных простейших E. gingivalis в полости матки.

Рис. 30.

Entamoeba gingivalis, колонизированная вокруг внутриматочного противозачаточного средства, проанализирована с помощью ПЦР с использованием метода переноса клеток.Слева: Папаниколау, справа: электрофорезные полосы амплифицированного продукта. Вокруг актиномикотического зерна (звездочка) видны амебоподобные клетки, фагоцитирующие нейтрофилы (красные стрелки). Видно центрально расположенное ядро ​​с выступающей кариосомой (зеленая стрелка). ДНК экстрагировали из фрагментов перенесенных клеток. ПЦР проводили в течение 35 циклов. Последовательность ДНК E. gingivalis была доказана на основе спаренной полосы из 221 оснований (желтая стрелка). Смысловой праймер: 5′-tcagataccgtcgtagtcct-3 ‘, антисмысловой праймер: 5′-cctggtgtgcccttccgt-3’.

4. Цитодиагностика бактериальной инфекции

Цитологическая служба играет важную роль в обнаружении и предположительной идентификации микроорганизмов [60]. Вообще говоря, цитодиагностика бактериальной инфекции легче достижима для внеклеточных патогенов, чем для внутриклеточных патогенов. Следует также отметить, что бактерии более устойчиво наблюдаются в препаратах, окрашенных по Гимзе, чем в препаратах, окрашенных по Папаниколау. Для иммуноцитохимического подтверждения полезны упомянутые выше методы (использование клеточного блока и повторного окрашивания или метода переноса клеток).Типичные примеры цитодиагностики бактериальной инфекции описаны ниже.

4.1 Бактериальный вагиноз

Грамположительные палочки большого размера, Lactobacillus или так называемые палочки Додерлейна, представляют собой нормальную флору (местную микробиоту) влагалища и поддерживают местную кислотность на уровне pH 3,8–4,5 за счет производства молочной кислоты . Их длина составляет от 2 до 9 мкм, ширина от 0,5 до 0,8 мкм. Молочная флора производит перекись водорода и антимикробные пептиды (бактериоцины) для подавления роста других микробов [61].Количество неподвижных бацилл увеличивается примерно в период овуляции через секреторную фазу менструального цикла. Бациллы Додерлейна наблюдаются у здоровых зрелых (пременопаузальных) женщин, но после менопаузы без гормональной активности они больше не наблюдаются в цитологическом препарате. В препаратах, окрашенных по Папаниколау, они выглядят как однородно базофильные большие палочки без образования спор. На фоне обычно наблюдается незначительное воспаление, но иногда они фагоцитируются нейтрофилами [62].

В случае бактериального вагиноза (вагинита) патологические бактерии растут, и бациллы Додерлейна заметно уменьшаются или полностью исчезают [63, 64]. Типичным примером является гарднереллезный вагинит, вызванный инфекцией Gardnerella vaginalis , небольшой (размером от 1 до 1,5 мкм) грамотрицательной немобильной коккобациллой. Небольшие бактерии, G. vaginalis , часто группируются на плоских клетках поверхностного типа, образуя так называемые «ключевые клетки». Инфекция Gardnerella часто проявляется в пролиферативной фазе менструального цикла.Инфекция обычно связана с нейтрофильной реакцией, но в некоторых случаях может наблюдаться слабый нейтрофильный ответ, отсюда термин «бактериальный вагиноз» вместо бактериального вагинита.

Другой микроб, вызывающий бактериальный вагиноз, — это Mobiluncus , spp., V-образная или серповидная подвижная облигатная анаэробная палочка с нестабильной реактивностью по Граму. По размеру она занимает промежуточное положение между бациллой Додерлейна и G. vaginalis . Atopobium (Fannyhessea) vaginae , облигатная анаэробная грамположительная эллиптическая коккобацилла небольшого размера (менее 1 мкм), часто образующая короткую цепочку (несколько напоминающую стрептококк), является недавно зарегистрированным членом, вызывающим бактериальный вагиноз [65].Рост нитчатой ​​длинной палочки, Leptothrix , может быть связан с бактериальным вагинозом. После менопаузы эти бактерии часто могут быть заменены энтеробактериями, такими как Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae . Pseudomonas aeruginosa может колонизировать слизистую влагалища, сопровождая образование биопленки (см. Фигуру 37). Все эти микробы провоцируют нейтрофильный экссудат.

На рис. 31 представлена ​​репрезентативная цитоморфология вагинальных бактерий в препаратах, окрашенных по Папаниколау.

Рис. 31.

Бацилла Додерлейна (Lactobacillus) и микробы, вызывающие бактериальный вагиноз (мазки из шейки матки, Папаниколау). a: палочка Додерлейна, b: Gardnerella vaginalis, c: Mobiluncus, d: Atopobium vaginae, e: Leptothrix, f: Klebsiella pneumoniae. Бациллы Додерлейна, нормальные обитатели влагалища, имеют большие размеры и иногда фагоцитируются нейтрофилами (наконечник стрелки). G. vaginalis имеет небольшой размер и часто группируется на поверхностных кератиноцитах, образуя «ключевые клетки». Mobiluncus среднего размера, имеет форму V или полумесяца.A. vaginae выглядит как сцепленные кокковидные микробы, напоминающие Streptococcus (стрелка). Лептотрикс — непатогенные нитчатые бактерии. K. pneumoniae представляет собой капсулообразующую бациллу большого размера, которая в основном встречается на слизистой оболочке влагалища в постменопаузе.

4.2 Хламидийная инфекция

Хламидиоз является типичным и распространенным ЗППП. Симптоматический негонококковый уретрит наблюдается у пациентов мужского пола, тогда как симптомы легкие у женщин. Столбчатые эпителиальные клетки, инфицированные Chlamydia trachomatis , содержат цитоплазматические тельца включения круглой формы, называемые невулярными тельцами включения [66].Жизненный цикл хламидиоза показан на рисунке 29. Иммуноцитохимия с использованием метода повторного окрашивания или метода переноса клеток весьма эффективна для постановки диагноза хламидиоза (см. Рисунки 22 и 28). В большинстве случаев хламидиоз ассоциирован с бактериальным вагинозом, так что на заднем фоне наблюдается различное количество нейтрофилов. Хламидийная инфекция обычно вызывает образование лимфоидных фолликулов в слизистой оболочке: лимфоцитарный фон можно увидеть в препарате мазка из шейки матки, как C.trachomatis -ассоциированный фолликулярный цервицит [67].

Включения хламидий также видны в цитологических образцах, взятых из уретры мужчины. C. trachomatis вызывает эпидидимит и сальпингит. Следует обратить внимание на экстрагенитальный хламидиоз [68]. Хламидийный фарингит и проктит возникают при оральном и анальном сексе соответственно. Острый хламидийный конъюнктивит встречается у сексуально активных молодых мужчин, а цитоплазматические включения выявляются с помощью быстрого окрашивания по Гимзе (Дифф-Квик).Характерные черты показаны на фигуре 32.

Рисунок 32.

Хламидийная инфекция (слева: иммуноокрашивание на хламидийный антиген в соскобе мужской уретры с контрастным красителем метилзеленый, справа: цитология соскоба конъюнктивы, окрашенная по Гимзе). В ряде эпителиальных клеток уретры и конъюнктивы имеются хламидийные цитоплазматические тельца включения. Обратите внимание на экстрагенитальную инфекцию глаза C. trachomatis (стрелки).

4.3 Гонококковая инфекция

Гонорея — классический пример ЗППП. Neisseria gonorrhoeae , грамотрицательный парный кокк (диплококк), вызывает острый уретрит у мужчин и проявляет высокое сродство к эпителиальным клеткам уретры [69]. На рис. 33 показан цитологический анализ мочи 28-летнего одинокого пациента мужского пола из Японии. Следует отметить, что парные кокки специфически прикрепляются к крупным плоскоклеточным клеткам уретрального происхождения. Обычно диплококки фагоцитируются нейтрофилами. Цитологический диагноз гонореи можно поставить сразу.

Рисунок 33.

Гонококковая инфекция (a: выделения из уретры, Giemsa, b & c: цитология мочи, Papanicolaou [b] и Giemsa [c]). Парные кокки фагоцитируются нейтрофилом в гнойных выделениях из уретры (а). Neisseria gonorrhoeae обнаруживает специфическое сродство к клеткам плоского эпителия уретры (b и c). Фоновые уротелиальные клетки мочевого пузыря лишены колонизации. Предоставлено г-ном Томохиро Ватанабэ, Чукен Кумамото, Япония.

4.4 Бактерии, растущие в жидких образцах и выделениях

Острый цистит часто встречается у женщин, чаще всего вызван инфекцией Escherichia coli .Пирурия — важный признак бактериального цистита. В случае острого цистита у мужчин пожилого возраста следует учитывать связь гиперплазии предстательной железы, вызывающей стеноз уретры. Рак мочевого пузыря часто может быть связан с ростом бактерий в моче. Палочки в основном представляют собой E. coli , в то время как цепные кокки обычно принадлежат Enterococci (Рисунок 34). См. Также фиг. 11b, где кокки ( Enterococcus faecalis ) активно фагоцитируются нейтрофилами в моче.В частности, когда очевидна нейтрофильная реакция, диагноз бактериального цистита следует добавить к диагнозу уротелиальной карциномы.

Рисунок 34.

Бактериальный острый цистит (a: общий вид пиурии, b: палочки, Гимза, c и d: цепные кокки с уротелиальными раковыми клетками, Папаниколау [c] и Giemsa [d]). На дне пробирки образуется осадок мочи белого цвета (состоящий из нейтрофилов). Палочки, вызывающие цистит, обычно принадлежат Escherichia coli (a и b).Enterococcus faecalis или E. faecium также вызывают острый цистит (c и d). Следует отметить, что рак мочевого пузыря часто сопровождает вторичный бактериальный цистит.

Точно так же цитологические образцы желчи могут выявить рост бактерий вокруг клеток аденокарциномы. Следует исключить возможность восходящего гнойного холангита из-за злокачественной непроходимости желчных протоков. Это может указывать на неотложное состояние, требующее немедленной терапии антибиотиками. Следовательно, цитодиагностика должна включать аденокарциному плюс бациллярную колонизацию.Окрашивание по Гимзе превосходит окрашивание по Папаниколау для выявления инфекции внеклеточных бактерий.

Если вы обнаружите бациллы в образцах асцита или плеврального выпота, вам следует проверить, как образец хранился до процедуры центрифугирования для получения осадка [70]. Если образец хранился на ночь при комнатной температуре, после отбора образца бактерии росли. Нейтрофильный ответ отсутствует. В образце мочи, оставленной на длительное время, уреазная активность бактерий, выделяющих аммонийные железо, вызывает подщелачивание мочи, что приводит к отложению кристаллов аммоний-магниевого фосфата и некристаллического фосфата.Типичные цитологические особенности показаны на рисунке 35. Сравните их с образцом подлинного бактериального плеврита, вызванного Streptococcus milleri , как показано на рисунке 11c.

Рисунок 35.

Рост бактерий в жидком цитологическом материале (a: стержни, растущие с аденокарциномой желчного протока, цитология желчи, Giemsa, b: стержни, растущие в асцитической жидкости, Giemsa, c: кристаллы фосфата аммония-магния в щелочной моче индуцированный бациллярным ростом). В желчи наблюдается заметный рост палочек вокруг клеток аденокарциномы (а).Следует исключить возможность вторичного восходящего заражения Enterobacteriae. Рост стержней в асцитической жидкости мог произойти после отбора пробы (б). Образец оставляли на ночь при комнатной температуре, и нейтрофилы оказались автолитическими. Отложение кристаллов происходит, когда образец мочи был оставлен на длительное время (c). Активность бактериальной уреазы ускоряет ощелачивание мочи.

4.5 Морфологические изменения грамотрицательных палочек

Введение пенициллина широкого спектра действия и антибиотиков цефем может вызвать значительные морфологические изменения грамотрицательных бактерий Enterobacteriae в желчи и моче.К ним относятся филаментозная деформация и сферопластическое изменение. Бета-лактамные антибиотики, связанные с пенициллин-связывающими белками на мембране бактериальной клетки, препятствуют росту бактерий, что приводит к изменению формы [71, 72]. В желчи, показанной на Фигуре 36, Klebsiella pneumoniae сопровождается заметным удлинением и изменением сфероида. Микробная культура желчи была положительной на K. pneumoniae . Морфологически измененные бактерии чем-то напоминают грибы. Нити и сферопласты отрицательны при окраске по Граму и Грокотту. Pseudomonas aeruginosa в моче также может обнаруживать заметные нитевидные изменения. Из-за эффекта лечения антибиотиками нейтрофильный ответ может подавляться.

Рис. 36.

Изменения формы Klebsiella pneumoniae в желчи, вызванные антибиотиками: образование нитей и сферопластов (a и b: Папаниколау, c: Гимза). Округлая форма называется сферопластом (стрелки). Бета-лактамные антибиотики, связанные с пенициллин-связывающим белком на мембране бактериальной клетки, вызывают изменение формы грамотрицательных палочек.В этом случае микробная культура подтвердила инфицирование K. pneumoniae. Требуется отличие от грибковой колонизации.

В состоянии с ослабленным иммунитетом Enterobacteria , такие как E. coli и K. pneumoniae , могут размножаться в цитоплазме макрофагов в органах пищеварения и мочевыводящих путей, проявляя ксантогранулематозное воспаление и малакоплакию (рис. 17), как указано выше (рис. 17). .

4.6 Инфекция биопленок

Pseudomonas aeruginosa мукоидной формы обычно сопровождает инфекцию биопленок.Бактерии, образующие биопленку, прилипают друг к другу, а также к поверхности материала или поврежденной слизистой. Прилипшие бактерии внедряются в слизистую (слизистую) внеклеточную матрицу или секреторную капсулу. Биопленка защищает микроб от атаки нейтрофилов, антител, комплементов и антибиотиков: инфекция биопленки представляет собой состояние устойчивости бактерий к терапии антибиотиками [73, 74]. Образующий биопленку P. aeruginosa может, таким образом, вызывать стойкую и трудноизлечимую инфекцию, особенно в дыхательных путях.Таким образом, нейтрофильный ответ хозяина часто бывает незначительным. Репрезентативные примеры заражения биопленкой показаны на рисунке 37. См. Также рисунок 44f. Аденокарцинома желчного пузыря была цитологически связана с инфекцией биопленок палочек, P. aeruginosa , встроенных в слизистый матрикс. Во влагалище пожилых людей после гистерэктомии цитологически подтверждено инфицирование P. aeruginosa мукоидного типа.

Рисунок 37.

Биопленочная инфекция синегнойной палочки (Папаниколау, слева: желчь, справа: мазок из влагалища у пожилых людей).Колонии мукоидного типа (стрелки) образуются как в желчи, так и во влагалище. Аденокарцинома была обнаружена в левом случае, в то время как история гистерэктомии была записана в правом случае в возрасте 70 лет. Стержни заключены в толстую капсулу. Микробная культура идентифицировала P. aeruginosa в обоих случаях. Инфекция биопленки устойчива к химиотерапии.

Биопленка также может быть образована капсулообразующими бактериями, такими как стрептококки, стафилококки и энтерококки.

4.7 Цитология соскоба / прикосновения мазка вскрытого легкого

Мы, патологоанатомы, обычно сталкиваемся с пневмонией при вскрытии.Нозокомиальная (внутрибольничная) пневмония часто вызывается метициллин-резистентным Staphylococcus aureus (MRSA) или Enterobacteriae , в то время как внебольничная пневмония может быть результатом инфицирования Streptococcus pneumoniae , Haemophilus influenzae (Moemophilus influenzae , Haemophilus influenzae , ) catarrhalis и т. д. В случае летальной крупозной пневмонии микробы-кандидаты, являющиеся возбудителями, включают S. pneumoniae и Legionella pneumophila [75].

Окрашенный по Гимзе соскоб или цитологический анализ мазка на ощупь, взятый из очага пневмонии, практичен для определения возбудителя болезни во время аутопсии. Патологам важно избегать биологической опасности. S. pneumoniae передается воздушно-капельным путем, в то время как L. pneumophila не передается от человека к человеку. Окрашивание по Хименесу также полезно для демонстрации микроба. На Фигуре 38 показан цитологический соскоб, взятый из летальной крупозной пневмонии у пожилого пациента.См. Также рисунок 14a. Палочки фагоцитировали макрофагами, так что микроб-возбудитель был идентифицирован как L. pneumophila , внутриклеточный микроорганизм. Следует отметить, что основными клеточными реагентами против L. pneumophila являются макрофаги. Из-за малого количества лимфоцитарного ответа гранулемы не образуются. Следует подчеркнуть важность L. pneumophila как причины внебольничной крупозной пневмонии у пожилых [76].

Рисунок 38.

Дольчатая пневмония, вызванная Legionella pneumophila (подготовка мазка из вскрытого легкого, Giemsa, вставка: Giménez). Палочки фагоцитируются макрофагами и нейтрофилами, что указывает на крупозную пневмонию, вызванную L. pneumophila. Окраска по Хименесу — это простой метод визуализации возбудителя в красном цвете. Подтверждение возбудителя болезни во время вскрытия помогает избежать биологической опасности. L. pneumophila не передается от человека к человеку, в то время как Streptococcus pneumoniae, еще один кандидат, вызывающий крупозную пневмонию, может заразить человека воздушно-капельным путем.

4.8 Нокардиоз

Нокардиоз обычно встречается у пациентов с ослабленным иммунитетом [77, 78]. Nocardia asteroides , грамположительная нитчатая и аэробная бактерия, может быть продемонстрирована в образцах цитологического исследования бронхов. Молодой мужчина, страдающий язвенным колитом, при лечении стероидами пожаловался на жар, кашель и мокроту. Рентгенологически была выявлена ​​кавитация в его левой верхней доле легкого, и клинически заподозрили грибковую инфекцию.Сообразительный цитотехнолог провел окраску по Грокотту в цитологическом препарате. На фоне нейтрофильной реакции выявлены нитчатые бактерии, окрашенные по Грокотту, и поставлен диагноз нокардиоз. Нитевидные бактерии нелегко распознать в препарате, окрашенном по Папаниколау, потому что они не образуют агрегированных зерен. Они были дополнительно положительными при окрашивании по Граму и Циль-Нильсену. Грамположительность и слабая кислотостойкость характеризуют Nocardia .Рисунок 39 иллюстрирует цитопатологические проявления нокардиоза легких. Микробная культура идентифицировала N. asteroides , и введение сульфаниламидов было клинически достаточно эффективным.

Рисунок 39.

Нокардиоз легкого (цитология чистки бронхов, слева: Grocott, справа: Gram, вставка: Ziehl-Neelsen). У молодого пациента мужского пола, проходящего лечение стероидами против язвенного колита, был замечен абсцесс легкого. В цитологическом исследовании чистки бронхов при окрашивании по Грокотту и по Граму наблюдаются скопления нитчатых бактерий.Нейтрофильная реакция против возбудителя очевидна. Нити слабо кислотоустойчивы. Часто бывает трудно идентифицировать волокна при окрашивании по Папаниколау. Астероиды Nocardia были идентифицированы с помощью микробной культуры.

4.9 Актиномикоз

Актиномикоз, инфекция Actinomyces israelii , встречается у иммунокомпетентных людей [79, 80], что резко контрастирует с нокардиозом. Для актиномикоза характерно образование гранул серы, достигающих размеров 1-2 мм (рис. 40).См. Также рисунок 11d. Гранулы серы представляют собой плотный кластер облигатно анаэробных нитчатых бактерий, внедренный в гомогенную, периодическую кислотно-Шиффовую (PAS) -реактивную матрицу, называемую материалом Splendore-Hoeppli. Нити визуализируются красителями по Граму, PAS и Grocott. Наблюдается активный нейтрофильный ответ против зерен. В легких гранулы серы обычно видны в разрушенных дыхательных путях, а воспалительная псевдоопухоль может образовываться в результате тяжелого воспалительного фиброза.Актиномикоз также встречается в полости рта, печени и органах малого таза, включая эндометрий (см. Также рисунок 30). Актиномикотические зерна часто видны в ямке увеличенной глоточной миндалины как непатогенный резидентный микроб.

Рисунок 40.

Актиномикоз эндометрия (цитология соскоба, Папаниколау, слева: малое увеличение, справа: высокое увеличение). Образование гранул серы характерно для инфекции Actinomyces israelii. Гранула окружена нейтрофилами и состоит из нитчатых бактерий, встроенных в гиалиновый матрикс, называемый материалом Splendore-Hoeppli.В отличие от нокардиоза, диагноз актиномикоза можно установить с помощью окрашивания по Папаниколау. Актиномикоз эндометрия может быть спровоцирован введением внутриматочного противозачаточного средства.

4.10 Туберкулез и нетуберкулезный микобактериоз

Если при цитологическом исследовании соскоба бронхов выявляется гранулема эпителиоидных клеток, следует учитывать возможность туберкулеза легких (рис. 41). См. Также рис. 12. Часто некротический фон связан с этим [81, 82]. Нечасто туберкулезный плеврит может вызывать эозинофильную экссудацию (рис. 18b).

Рисунок 41.

Туберкулез легких (цитология чистки бронхов, Папаниколау, слева: малое увеличение, справа: высокое увеличение). Скопления эпителиоидных клеток представляют собой гранулематозную реакцию. Связь некротического фона (слева) убедительно свидетельствует о микобактериальной инфекции. Туберкулез (инфекция Mycobacterium tuberculosis) сложно отличить от нетуберкулезного микобактериоза. Требуется не только правильный цитологический диагноз, но и быстрое предупреждение о внутрибольничной биологической опасности.Также обратите внимание, что нетуберкулезные микобактерии не представляют биологической опасности.

Важная задача цитопатолога — привлечь внимание персонала больницы к биологической опасности [83]. В условиях подавления иммунитета многочисленные кислотоустойчивые бациллы фагоцитируются макрофагами, и окрашивание по Гимзе выявляет отрицательно окрашенные длинные палочки в их цитоплазме [84] (рис. 42). Наружная мембрана клеточной стенки микобактерий содержит большое количество гликолипидов, особенно миколиновых кислот [85].Эта уникальная структура клеточной стенки не только обеспечивает кислотостойкость, но и препятствует проникновению красителей в раствор Гимзы. Mycobacterium tuberculosis , типичная кислотоустойчивая палочка, передается воздушно-капельным путем. Забор бронхов проводится в изолированном помещении, оборудованном для бронхофиброскопии, поэтому требуется обследование у лиц, с которыми ведется непосредственный контакт. Цитологическая лаборатория может быть заражена передаваемым устойчивым к засухе патогеном внутри ядра капли.Бактериальная морфология неотличима от туберкулеза и нетуберкулезного микобактериоза [82]. Различие между ними важно, поскольку нетуберкулезные микобактерии не передаются от человека к человеку. Идентификация M. tuberculosis с помощью полимеразной цепной реакции, а также анализа с высвобождением гамма-интерферона (QuantiFeron или T-Spot) [86] с использованием крови пациента и лиц, находящихся в близком контакте, чрезвычайно важны для предотвращения профессиональных заболеваний. инфекционное заболевание.Таким образом, в случае туберкулеза настоятельно требуется не только точная цитодиагностика, но и быстрое предупреждение о внутрибольничной биологической опасности.

Рисунок 42.

Отрицательное окрашивание микобактерий, фагоцитируемых макрофагами (цитология чистки бронхов, слева: Папаниколау, справа: Гимза). На препарате, окрашенном по Папаниколау, видна эпителиоидная гранулема. Окрашивание по Гимзе полезно для идентификации кислотоустойчивых бацилл, поскольку микобактерии устойчивы к окрашиванию. Таким образом, неокрашенные бациллярные изображения четко различимы в цитоплазме макрофагов.В мазке Папаниколау бациллы не видны. В этом случае культивировали Mycobacterium avium (представитель нетуберкулезных микобактерий). Предоставлено г-ном Томохиро Ватанабэ, Чукен Кумамото, Япония.

Если в одном и том же образце видны эпителиоидная гранулема и нейтрофильная реакция, следует заподозрить возможность гнойной гранулемы. Типичный пример — болезнь кошачьих царапин (бартонеллез) (рис. 16), вызванная инфекцией Bartonella henselae [87]. Эта ассоциированная с клещами инфекция обычно наблюдается в шейных или подмышечных лимфатических узлах и нечасто поражает селезенку.

4.11 Бактерии в крови

Некоторые бактерии могут обнаруживаться в периферической крови (Рисунок 43). Спиральные микробы Borrelia recurrentis обнаруживаются в периферической крови на ранней стадии возвратного тифа. Фебрильное заболевание является эндемическим заболеванием на африканском континенте [88]. При бактериальной сепсисе в препаратах периферической крови иногда обнаруживаются бактерии, фагоцитируемые фагоцитами (нейтрофилами и моноцитами). При сепсисе Capnocytophaga canimorsus , вызванном укусом собаки, некоторые бациллы фагоцитируются нейтрофилами [89]. Streptococcus suis , важный патоген свиней, может вызывать менингит и летальную сепсис у человека, который разводит свиней или обрабатывает свинину. Заболевание эндемично для Юго-Восточной Азии [90]. Исследование гибридизации in situ (ISH) лейкоцитарной пленки периферической крови при сепсисе, инфицированном Escherichia coli / Klebsiella pneumoniae , Staphylococcus aureus или Pseudomonas aeruginosa , даже после обнаружения сигналов бактериальной ДНК в цитоплазмах химиотерапия [91].

Рис. 43.

Бактерии, обнаруженные в крови (Giemsa, a: возвратный тиф, b: септицемия Capnocytophaga canimorsus, c: септицемия Streptococcus suis). При внимательном наблюдении за препаратами периферической крови, окрашенными по Гимзе, иногда можно выявить патогены. На ранней стадии возвратного тифа в крови появляются спиральные возбудители Borrelia recurrentis. Фульминантная и летальная сепсис зоонозного происхождения встречается редко. Кончиками стрелок обозначены палочки, фагоцитируемые нейтрофилами в случае C.canimorsus инфекция. Диплококки видны на красной клетке (стрелка) в случае сепсиса S. suis, наблюдаемого у свиновода.

4.12 Бактерии, обнаруженные в препаратах мокроты: важность окрашивания по Граму

Окрашивание по Граму — дешевый и быстрый метод выявления патогенных микроорганизмов на препаратах мазка мокроты, экссудата, жидких материалов и выпотов. Следует подчеркнуть важность окрашивания по Граму в диагностике пневмонии [92, 93]. Чтобы получить результат, нужны минуты.

Типичный микроскопический вид препаратов мокроты, окрашенных по Граму, показан на Рисунке 44.К ним относятся Streptococcus pneumoniae , устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA), Moraxella (Branhamella) catarrhalis , Haemophilus influenzae , Klebsiella pneumoniae и Puginosa и Klebsiella pneumoniae . Грамположительность и форма (кокки или бациллы), а также размер, формирование капсул и внешний вид (парные, сгруппированные или сцепленные) дают нам ценную информацию для микробов. Представление бактерий, фагоцитируемых фагоцитарными клетками (в основном нейтрофилами и иногда макрофагами) или окруженными нейтрофилами, убедительно указывает на этиологический (патогенный) агент пневмонии.Независимо от того, является ли пневмония внебольничной или внутрибольничной, также очень важно для определения бактерий-возбудителей. Бактерии на плоском эпителии и вокруг него считаются нормальной флорой, обитающей в полости рта. Нам необходимо оценить количество плоского эпителия и нейтрофилов в образцах.

Рисунок 44.

Патогены, вызывающие пневмонию в мокроте (грамм, a: Streptococcus pneumoniae, b: устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA), c: Moraxella (Branhamella) catarrhalis, d: Haemophilus influenlebsiella, e: е: синегнойная палочка).Окрашенные по Граму препараты позволяют быстро идентифицировать возбудителей пневмонии. Кокки видны на a-c, а стержни на d-f. Окрашивание по Граму положительное в a и b, но отрицательное в c-f. бактерии фагоцитируются нейтрофилами в b и c, тогда как патогены, образующие капсулу, ускользают от фагоцитоза в a, d-f. мукоидная форма наблюдается у f. стержни в e и f намного больше, чем в d.

Комплексное управление нематодами для картофелеводов

Нематоды — обычная проблема для производителей картофеля на северо-западе Тихого океана.Эти микроскопические круглые черви питаются корнями растений и передают болезни, вызывая множество симптомов.

Но существуют решения, которые могут помочь уменьшить повреждение посевов, лечить заражения в текущем сезоне и предотвратить заражение полей в следующем сезоне.

«Для защиты картофеля от нематод в течение всего сезона критически важно внедрение интегрированной системы управления», — сказал Стив Олсон, старший менеджер по продукции Crop Science.

Разнообразный вредитель

Узловые нематоды — одна из наиболее широко встречающихся разновидностей нематод, поражающих многие сельскохозяйственные культуры, включая картофель.Их личинки проникают в корни или клубни и устанавливают места питания, что приводит к снижению жизнеспособности растений и появлению пятен на клубнях. Как следует из названия, нематоды с корневыми узелками также могут вызывать образование твердых опухших узлов на корнях растений.

Другой тип нематод, обычно встречающийся в регионах выращивания картофеля, — это золотистая нематода, которая питается корнями растений и превращается в опухшие цисты на участке питания. По данным Университета Небраски, эти нематоды получили свое название от золотисто-желтой стадии, через которую они проходят, прежде чем стать кистой.

Обработка нематод для защиты качества и урожайности картофеля

Одной из культурных практик является ранний сбор быстро созревающих сортов картофеля. Чем дольше клубни остаются на поле, тем больше вероятность воздействия нематод на урожай. Обеспечение надлежащего баланса питательных веществ и удобрений на полях также может помочь улучшить силу растений, что приведет к снижению воздействия нематод.

Севооборот также может помочь сократить популяции нематод с полей.Несколько примеров культур, не являющихся хозяевами, включают пшеницу, кукурузу и некоторые виды масличной редьки.

Также существуют химические варианты, помогающие бороться с нематодами. При правильном опрыскивании листьев картофелеводы могут защитить свой урожай от нематод и повысить качество и количество сезонного урожая.

Инсектицид

Movento ^® двустороннего системного действия распространяется по всей системе растения, что позволяет наносить его на листья, обеспечивая защиту от наземных вредителей.Он также перемещается к корням, чтобы защитить растения от нематод.

Повреждение нематодами корневых узлов ирландского картофеля | Home Guides

Нематоды — микроскопические круглые черви, обитающие в почве. Некоторые питаются водорослями и не причиняют особого вреда. Но патогенные нематоды питаются корнями растений. В достаточно большом количестве эти нематоды наносят настолько большой ущерб ткани корня, что растение больше не может адекватно поглощать необходимую воду или питательные вещества. Нематоды корневых узлов (Meloidogyne spp.) являются серьезной проблемой для ирландского картофеля (Solanum tuberosum). Заражение может привести к появлению непригодных для использования клубней, а также к увяданию, задержке роста или пожелтению растения.

Нематоды корневых узлов

Нематоды корневых узлов — это небольшие нематоды, которые перемещаются по почве, пока не найдут корни растений, которыми они могут питаться. Самцы прокалывают клетки корневой ткани ланцетной структурой, называемой стилетом, вытягивают содержимое и затем переходят на другое место кормления. Это питание заставляет поврежденные клетки разрушаться и умирать.Однако самки находят место для кормления и становятся малоподвижными, зарываясь головой в ткани. По мере кормления они меняют форму от червеобразной до шаровидной или круглой. В зрелом возрасте самка откладывает яйца, смешанные с студенистым материалом, который прилипает к ее телу, после чего самка умирает. Яйца вылупляются, и новое поколение нематод начинает питаться.

Повреждение картофеля

Повреждение корневыми узелками ирландского картофеля проявляется в виде грубых бородавчатых пятен на внешней стороне клубня.Внутри мертвые самки и их яйца выглядят как маленькие золотисто-коричневые пятна на мякоти картофеля, если удалить тонкую полоску картофельной кожуры. Эти коричневые пятна темнеют при жарке картофеля, что делает повреждение еще более заметным. Помимо повреждения клубней картофеля, надземные части растения могут отставать, увядать или желтеть, поскольку корневая система медленно разрушается.

Виды, поражающие картофель

Известно, что пять видов нематод корневых узлов заражают картофель в Соединенных Штатах.Из них наиболее опасным видом на северо-западе Тихого океана является нематода колумбийского корневого узла (Meloidogyne Chitwoodii). Нематода корневого сучка Columbia встречается на песчаных и органических почвах и поражает более 3000 различных растений. Надземные симптомы у этой нематоды гораздо менее заметны, чем у других видов. Снижение урожайности является меньшим результатом заражения, чем повреждение клубней картофеля. Нематода южного корневого узла (Meloidogyne incognita), нематода северного корневого узла (Meloidogyne hapla), нематода корневого узла арахиса (Meloidogyne arenaria) и яванская нематода корневого узла (Meloidogyne javanica) также являются вредителями ирландского картофеля, но в различной степени являются вредителями ирландского картофеля. не более чем колумбийский корневой узел.

Контроль

Профилактика, севооборот и надлежащие методы культивирования — лучшие альтернативы использованию нематицидов в приусадебных участках. Сажайте только клубни картофеля, сертифицированные как свободные от вредных организмов. Не переносите почву с поля на поле с помощью посевных и почвообрабатывающих орудий, так как это основной способ проникновения нематод в поле. Убедитесь, что любой компост, внесенный в сад, был обработан должным образом, чтобы убить присутствующих нематод. Чередуйте картофель с культурами, не являющимися хозяевами, такими как люцерна, чтобы подавить завязку колумбийского корня.К сожалению, устойчивых к нематодам сортов картофеля не существует. Оставление полей под паром в течение года сократит популяцию нематод на 80–90 процентов. Удалите и уничтожьте все клубни или ростки прошлогоднего урожая.

Ссылки

Writer Bio

Любовь Кэти Имбриани к садоводству зародилась в детстве, проведенном на семейной ферме. Она является соавтором двух книг по садоводству и множества статей по науке и садоводству. Имбриани имеет степень бакалавра наук в области садоводства Университета штата Северная Каролина.

Нематода с корневыми узлами | CropWatch

Нематоды корневых узлов распространены по всему миру и играют в первую очередь важную роль в тропическом и субтропическом климате. Описано более 60 видов, и постоянно выявляются новые. В умеренном климате на картофеле наиболее опасными видами являются Meloidogyne chitwoodi или нематода корневого узла Columbia. В США он встречается на северо-западе Тихого океана (Вашингтон, Орегон, ID и северная Калифорния), в долине Сан-Луис, штат Колорадо, и штат Юта.M. chitwoodi вызвала эмбарго на экспорт семенных клубней из этих государств в некоторые страны, такие как Мексика. M. hapla или северная нематода корневого узла преобладает на северо-востоке и северо-центральной части США, а также в восточной и центральной Канаде. M. incognita или южная узловатая нематода встречается на юге США

.

Колумбийская нематода корневого сучка (m. Chitwoodi)

Жизненный цикл:

Яйца откладываются внутри корней, их может быть до 1000. Для размножения не требуются самцы.Вторая ювенильная стадия выходит из яйца и представляет собой инфекционный агент, проникающий в корни. Молодь неоднократно заражает корни, а также может инфицировать клубни. Они попадают в клубни через чечевицы (устьица или поры). После четвертой ювенильной стадии взрослые особи выходят из «гигантских клеток», которые развиваются для кормления молоди. Самцы похожи на червей, а самки грушевидные, около 1,5 мм (0,06 дюйма) в длину. M. chitwoodi любит песчаные почвы и температуру почвы 68-77 F для размножения. Эта нематода может давать от трех до пяти поколений за сезон в западной части США.S.A.

Дефект клубня, вызванный северной корневищной нематодой (M. hapla)

Симптомы и повреждения:

Корневые нематоды поражают клубни и вызывают появление пятен, в результате чего клубни не продаются в свежем виде и ухудшается качество обработки чипсов и картофеля фри. Клубни, инфицированные M. chitwoodi, часто выглядят бугристыми, но этого не происходит при заражении M. hapla. Помимо внешних дефектов, между кожей и сосудистым кольцом может возникнуть внутренний некроз.Эти некротические пятна вызваны самками, откладывающими яйца. Галлы образуются на корнях и клубнях. В случае M. chitwoodi прыщавые галлы появляются на клубнях, но не на корнях. Симптомы виноградной лозы встречаются редко, но сильно инфицированные растения могут быть низкорослыми, желтоватыми и увядать в условиях небольшого количества осадков.

Управление:

M. chitwoodi легко перемещается по почве вертикально на расстояние до четырех футов, что затрудняет борьбу с ними. Взаимодействие M. chitwoodi с почвенными патогенами отмечено в теплом климате, но мало задокументировано в странах с умеренным климатом.Из-за широкого диапазона хозяев севооборот имеет ограниченный эффект. Ежегодный контроль над сорняками-хозяевами помогает подавить рост популяции. M. chitwoodi любит травы, кукурузу и злаки. Некоторые зеленые удобрения, такие как рапс и суданга, используемые перед посадкой картофеля, могут уменьшить заражение клубней. Исследования по выведению устойчивых сортов картофеля в Северной Америке продолжаются. Сорта с коротким сезоном менее подвержены этим нематодам, поскольку заражение растений картофеля происходит в более позднем сезоне. Больше поражаются сорта с длительным сроком созревания.Могут использоваться почвенные фумиганты и доступны нематоциды.

---

Борьба с нематодами — Spudman

В борьбе с нематодами используется многосторонний подход: фумиганты по-прежнему являются основным средством воздействия, за ними следуют нематициды, сидераты, чистое оборудование и использование сертифицированных семян.

В то время как фумигация продолжает оставаться лучшим средством борьбы с нематодами, фумиганты сталкиваются с нарастающими ограничениями со стороны EPA и государственных природоохранных агентств.Из-за этого производители и производители химикатов начали искать другие программы борьбы с нематодами, нежели фумигация.

нематод можно найти почти в каждой экосистеме. Хотя многие из них полезны, а их обилие и разнообразие свидетельствуют о микробной активности в продуктивных почвах, существует группа нематод, играющих паразитические и патогенные роли среди растений картофеля.

Общее количество видов нематод оценивается более чем в один миллион, в настоящее время идентифицировано около 25 000 видов нематод.Эти трубчатые подземные микробы составляют около 80 процентов всех животных на Земле.

Четыре основных нематода, поражающих картофель, — это завиток, пораженный корень, корень и жало. Нематода картофельной гнили и две разновидности нематод картофельных цист являются источником региональных проблем в картофельной промышленности.

В некоторых регионах нематоды, поражающие корни, могут взаимодействовать с грибами вертициллия и способствовать раннему отмиранию, также называемому вертициллезным увяданием, а нематода с короткими корнями может быть переносчиком вируса табачной погремушки.

Когда дело доходит до нематод, вы должны уделять особое внимание управлению, — сказал Саад Хафез, нематолог из Пармского научно-исследовательского центра при Университете Айдахо, во время Вашингтонско-Орегонской конференции по картофелю в Кенневике, штат Вашингтон.

Это не то, что можно искоренить или устранить », — сказал он. «Фумигация очень хорошо помогает бороться с нематодами».

Хафез сказал, что текущие фумиганты, используемые для борьбы с нематодами и болезнями картофеля, включают Telone II, Telone C-17 и C-35 1,3D, Vapam (метамнатрий), Metam Potassium и Metam Ammonia.

«Метам натрия на самом деле не настоящий фумигант, но реагирует как фумигант. Это контактный биоцид, — сказал Хафез.

Telone C-17 представляет собой комбинацию Telone II и другого фумиганта, хлорпикрина, с двойным механизмом действия против нематод и вертициллеза.

Фил Хэмм, директор станции Хермистонского центра сельскохозяйственных исследований и распространения знаний (HAREC) государственного университета Орегона, также является ярым сторонником фумигантов.

«Окурить дорого, но не окуривать — дорого», — сказал Хамм аудитории Кенневика.«Если вы не окуриваете, у вас либо будет урожай, который не окупит затраты на выращивание урожая, либо у вас возникнут проблемы с нематодами, и вы все равно будете отвергнуты. ”

«Фумигация предназначена для отсрочки начала болезни», — сказал Хамм.

Хамм сказал, что Telone II хорошо дымится под землей и является отличным нематицидом, который хорошо справляется с четырьмя основными разновидностями нематод.

«Поскольку он так хорошо дымит, — сказал Хэмм, — мы уменьшаем его длину от 16 до 18 дюймов.Мы поставили эти стойки далеко друг от друга, и это очень хорошо работает. Он так хорошо дымится, что проходит сквозь все частицы почвы ».

Хамм сказал, что метамнатрий, или вапам, лучше всего подходит для применения в химии, добавив, что вода, кажется, очень хорошо перемещает его вниз по профилю почвы.

«Мы знаем, что с метамнатрием мы используем этот продукт для уменьшения вертициллеза, основной причины преждевременной смерти, фузариоза, пития и, возможно, других. Это также может повлиять на черную точку и ризоктонию », — сказал Хамм.

Хамм посоветовал производителям при использовании метамата натрия вносить достаточное количество воды, чтобы погрузить материал на глубину 12 дюймов, и обязательно использовать обработанную почву при окучивании.

Он сказал, что Telone C-17 работает очень хорошо, но его дороже использовать в широковещательном приложении. В HAREC они изучали возможность использования C-17 в ленточных приложениях во время посева, чтобы снизить стоимость его использования на всем поле.

Хотя фумигация остается первой защитой от нематод, другие линии защиты включают нематициды, сидераты и севооборот.

«Я хочу подчеркнуть, что мы работали над множеством новых химикатов», — сказал Хафез. «За последние 10 лет многие химические компании проявили интерес к разработке новых нематицидов.

В течение многих лет список нематицидов был коротким, в него входили Vydate, Mocap, Nimitz и Admire, но Хафез сказал, что новые продукты дали многообещающие результаты.

В отношении всех нефумигантных продуктов, он сказал, что как метод нанесения, так и время применения очень важны для успешного лечения.

Хафез сказал, что нематицид Нимиц, производимый Адамой, является хорошим нематицидом, но он плохо переносится в почве и лучше всего его использовать в сочетании с другими продуктами, а не как отдельное средство.

Было обнаружено, что недавно представленные продукты обладают эффективностью против нематод.

Хафез сказал, что инсектицид Movento компании Bayer CropScience оказался эффективным против нематод.

Он сказал, что Movento работает системно. Первое применение должно быть на стадии розового цвета растения, а через 14 дней следует второе нанесение.

«Вы должны наносить его, когда у вас достаточно листвы для проникновения, и вы должны наносить его с поверхностно-активным веществом», — сказал Хафез.

«Movento — очень активный нематицид, а не отдельное лечение», — сказал он. «Вы должны делать это в сочетании с Vapam, Vydate или Mocap».

Хафез рекомендовал использовать абсорбент, проникающий в почву, для улучшения движения воды с нематицидами.

«Мы обнаружили, что когда мы смешиваем Absorb с Vapam, мы получаем лучшие результаты в борьбе с нематодами», — сказал он.

DuPont продвигает свою программу V2, комбинацию Vydate и Vertisan, как программу борьбы с нематодами с преимуществом уменьшения использования метамнатрия.

Первый год полевых испытаний V2 оказался многообещающим, сказал Джефф Миллер, президент и генеральный директор Miller Research. Однако в течение второго года испытаний, в 2014 году, он и другие исследователи не увидели такого же уровня эффективности.

«Мы просто недостаточно знаем, чтобы рекомендовать его», — сказал Миллер. «Мы все еще находимся в режиме исследования и не готовы пойти и рекомендовать его как ответ или подходящую замену метаматрию.”

В 2015 году поставки Vydate будут ограничены из-за промышленной аварии 15 ноября 2014 года на химическом заводе DuPont в Ла-Порте, штат Техас.

Хафез сказал, что посадка растений, не являющихся хозяевами, или зеленых удобрений являются эффективными профилактическими стратегиями по сокращению количества нематод.

Он сказал, что исследование кукурузы, бобов и пшеницы показало, что кукуруза — плохая севооборотная культура, потому что нематода может выжить в корнях кукурузы.

No related posts.